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基于膠原蛋白—糖胺聚糖的生物材料研究及其在組織工程中的應用

發(fā)布時間:2021-07-03 04:27
  膠原蛋白和糖胺聚糖在體內(nèi)分布廣泛且種類繁多,是性能非常優(yōu)良的生物大分子。本研究旨在利用膠原蛋白和糖胺聚糖這兩類生物大分子為主要原料,進行適當?shù)男揎椇徒宦?lián)以構(gòu)建生物相容性良好、可降解的生物材料,通過溶脹測試、生物降解性能測試、掃描電鏡(SEM)形貌表征、力學性能測定、細胞相容性評價等手段對制備所得材料進行分析和研究,并選取最優(yōu)比例和制備方案,同時進一步探究制備所得的生物材料在組織工程中的應用。(1)將膠原蛋白(COL)分別與透明質(zhì)酸(HA)和肝素(HP)按一定比例混合制成COL-HA和COL-HP復合雙膜,用5 mM的EDC溶液進行交聯(lián)后,雙膜的韌性和機械強度得到增強,最大拉伸強度可達0.42 MPa;同時7 d降解率由交聯(lián)前的100%降低到72%,熱變性溫度由136.2°C升高到147.5°C,證明交聯(lián)后雙膜穩(wěn)定性增強。通過COL-HA層膜對成纖維細胞(COS-7)以及COL-HP層膜對人微血管內(nèi)皮細胞(HMEC)的生物相容性評價,發(fā)現(xiàn)該雙膜材料有利于細胞粘附、增殖以及伸長,有作為人造血管材料的潛力。(2)在COL分子上修飾對羥基苯甲酸(PHBA)得到產(chǎn)物COL-P,HA分子上修飾酪胺... 

【文章來源】:江南大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于膠原蛋白—糖胺聚糖的生物材料研究及其在組織工程中的應用


不同糖胺聚糖的重復二糖單位R=H或SO3;R’=H,COCH3或SO3Figure1RepeatingdisaccharideunitsofdifferentglycosaminoglycansR=HorSO;R’=H,COCH

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圖 2-1 復合雙膜與導管材料的制備Figure 2-1 The preparation of composite dual membrane and conduit材料原料與試劑表 2-1 試劑Table 2-1 Reagents試劑名稱 規(guī)格/含量 生產(chǎn)廠家原蛋白(COL) 300 kDa 無錫貝迪生物工程股份有限公司明質(zhì)酸鈉(HA) 200 kDa 華熙福瑞達生物醫(yī)藥有限公司肝素鈉(HP) 20 kDa 生工生物工程(上海)股份有限公司I 型膠原蛋白酶 125 U/mg 美國 Aladdin 公司1-丁基-3-甲基咪唑) 98% 薩恩化學技術(shù)(上海)有限公司胺鹽酸鹽(EDC·HCl) 98% 上海麥克林生化科技有限公司

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2 mL 去離子水中,至多能溶解 60 mg 膠原蛋白,所得的 3%差,在空氣中久置仍無法成膜。利用氯化(1-丁基-3-甲基咪唑白的溶解度提升至 10%,經(jīng)過實驗發(fā)現(xiàn),將 200 mg 膠原蛋白溶出的 10%膠原溶液成膜性能好,并將膠原蛋白分別復合一定量備雙層膜。為了增強雙層膜的機械性能,往往需要通過一定的,EDC 是一種典型的膠原蛋白交聯(lián)劑,對增強膠原蛋白材料的。其交聯(lián)原理主要是通過活化膠原蛋白上的羧基基團以形成酯與膠原上氨基的反應,實現(xiàn)膠原蛋白的自交聯(lián)。在膠原蛋白-糖DC 作為交聯(lián)劑,可以實現(xiàn)膠原蛋白的自交聯(lián)以及膠原與糖胺的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu),增強機械強度,并通過交聯(lián)起到上層網(wǎng)絡與下層測試了不同濃度 EDC 溶液(5 mM,25mM,50 mM)的交聯(lián) 50 mM 的 EDC 溶液進行交聯(lián)時,交聯(lián)后的雙膜很脆,及易發(fā)生交聯(lián)后的雙膜可以彎折拉伸,并通過特定模具制備成一定尺管結(jié)構(gòu)。如圖 2-2 所示,制備得到的 DL-Crosslink 導管形貌較可恢復原貌。


本文編號:3261867

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