第一部分不同超聲微泡濃度及質(zhì)粒濃度對(duì)pEGFP-N1-VEGF重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率的研究目的探討不同微泡濃度及質(zhì)粒濃度對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）存活率及pEGFP-N1-VEGF重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染率的影響,初步探索最佳的質(zhì)粒濃度及微泡濃度。方法將狀態(tài)良好的HUVEC交叉植入24孔板中的,對(duì)照組僅進(jìn)行超聲輻照,實(shí)驗(yàn)組中加入不同質(zhì)粒濃度和微泡濃度,然后進(jìn)行超聲輻照。加入質(zhì)粒使其終濃度分別為5μl/ml、10μl/ml、15μl/ml、20μl/ml、25μl/ml、30μl/ml,加入微泡使其終濃度分別為0μl/ml、50μl/ml、100μl/ml、150μl/ml、200μl/ml、250μl/ml。48h后臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞存活率,熒光顯微鏡定性觀察綠色熒光蛋白的表達(dá),流式細(xì)胞儀定量檢測(cè)基因轉(zhuǎn)染率,并用western-blotting對(duì)導(dǎo)入外源性基因在離體細(xì)胞中表達(dá)VEGF進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組中各亞組均有不同程度地?zé)晒獾鞍椎谋磉_(dá)。當(dāng)質(zhì)粒濃度小于等于20μl/ml時(shí),基因轉(zhuǎn)染率隨質(zhì)粒濃度的增加而增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;但大于20μl/ml時(shí),基因轉(zhuǎn)染率隨質(zhì)粒濃度增加改... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

一定超聲參數(shù)時(shí)（發(fā)射頻率1MHZ，功率1W/cm2，占空比20%，輻照時(shí)間

21圖 3. 光學(xué)顯微鏡下觀察不同微泡濃度時(shí) HUVEC 細(xì)胞存活率（100×）A：空白對(duì)照組 B：質(zhì)粒濃度 20μl/ml，微泡濃度 50μC：質(zhì)粒濃度 20μl/ml，微泡濃度 150μl/ml D：質(zhì)粒濃度 20μl/ml，微泡濃度 300μ對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)各亞組，細(xì)胞存活率兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05

4. 熒光顯微鏡下不同微泡濃度時(shí) HUVEC 細(xì)胞內(nèi) pEGFP-N1-VEGF 重組染情況（100×）：空白對(duì)照組（排除細(xì)胞自發(fā)熒光） B：質(zhì)粒濃度 20μl/ml，微泡濃度 5：質(zhì)粒濃度 20μl/ml，微泡濃度 150μl/ml D：質(zhì)粒濃度 20μl/ml，微泡濃度 30

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]超聲靶向微泡破裂法介導(dǎo)RNA干擾沉默survivin基因?qū)m頸癌HeLa細(xì)胞凋亡的影響[J]. 陳智毅,梁琨,謝明星,張靜.  腫瘤. 2009(07)
[2]超聲空化機(jī)理及其在抗癌領(lǐng)域應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 劉全宏,代樂(lè),齊浩.  臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志. 2006(04)



本文編號(hào)：3110066