目的探討脂肪干細(xì)胞向尿路上皮細(xì)胞分化的可行性,并將誘導(dǎo)后細(xì)胞與膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)復(fù)合培養(yǎng),評(píng)價(jià)細(xì)胞與支架材料的生物相容性,為進(jìn)一步構(gòu)建組織工程化組織提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法取6只8周齡雄性新西蘭大白兔的腹股溝脂肪組織和膀胱組織,通過膠原酶消化法分離脂肪干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）,同時(shí)通過胰蛋白酶消化的方法獲取尿路上皮細(xì)胞,流式細(xì)胞鑒定后將第3代脂肪干細(xì)胞與尿路上皮細(xì)胞間接共培養(yǎng)2周,并對分化后細(xì)胞進(jìn)行表型鑒定。隨后將分化后細(xì)胞種植在膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)上,通過掃描電鏡、組織學(xué)切片觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞在膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)上的生長情況。結(jié)果脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)成功并在體外擴(kuò)增,流式術(shù)檢測表面抗原CD分子,細(xì)胞高表達(dá)CD29（99.6%）、CD44（98.2%）;低表達(dá)CD31（1.9%）及CD45（1.6%）。通過間接共培養(yǎng)誘導(dǎo)分化后,細(xì)胞免疫熒光、Western blotting檢測到尿路上皮標(biāo)志物UPIa的表達(dá),而未誘導(dǎo)的脂肪干細(xì)胞無表達(dá)。掃描電鏡提示誘導(dǎo)后細(xì)胞在膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)上生長,黏附較好。組織學(xué)檢查可見膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)表面細(xì)胞平鋪生長。結(jié)論脂肪干細(xì)胞向尿路上皮誘導(dǎo)分... 

【文章來源】：中華全科醫(yī)學(xué). 2020,18(06)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

ADSCs不表達(dá)UPIa(×200)

為進(jìn)一步確認(rèn)ADSCs誘導(dǎo)后分化的效果,本實(shí)驗(yàn)中通過免疫熒光檢測誘導(dǎo)后細(xì)胞尿路上皮細(xì)胞特異性蛋白UPIa的表達(dá),將誘導(dǎo)后細(xì)胞爬片行免疫熒光檢測,結(jié)果提示:未誘導(dǎo)分化的ADSCs不表達(dá)特異性UPIa蛋白(圖4),而進(jìn)行共培養(yǎng)誘導(dǎo)后細(xì)胞可出現(xiàn)UPIa的表達(dá)(圖5)。通過Western blotting檢測尿路細(xì)胞特異性蛋白UPIa的表達(dá)水平,經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)后,誘導(dǎo)后細(xì)胞的尿路上皮細(xì)胞特異性蛋白UPIa表達(dá)上調(diào),而未誘導(dǎo)的ADSCs這2種特異性蛋白呈低表達(dá)狀態(tài)(圖6),結(jié)果與免疫熒光的結(jié)果相符,上述這些結(jié)果表明,脂肪干細(xì)胞在共培養(yǎng)體系的誘導(dǎo)下,誘導(dǎo)后的細(xì)胞已向尿路上皮細(xì)胞分化,具有尿路上皮的表型。圖2 ADSCs原代培養(yǎng)第10天(×40)

ADSCs原代培養(yǎng)第10天(×40)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]膀胱尿路上皮癌患者血清CA125的檢測及其臨床意義[J]. 馮瑞,李中興,沈斌,王星,葛廣成,吳丹,賈躍軍.  海南醫(yī)學(xué). 2015(20)



本文編號(hào)：3104713