目的研究絲素蛋白/聚己內(nèi)酯（silk fibroin,SF/polycaprolactone,PCL）制備的三維支架的生物相容性及降解性能。方法利用高壓靜電紡絲技術(shù)將SF/PCL溶液制備成三維支架式的纖維膜性結(jié)構(gòu)。通過添加下頜骨髁狀突軟骨細(xì)胞（mandibular condylar chondrocytes,MCCs）培養(yǎng)液與無細(xì)胞培養(yǎng)液,將SF/PCL三維支架膜分為實(shí)驗(yàn)組、對照組。通過觀測SF/PCL三維支架膜上軟骨細(xì)胞的生長情況探索其生物相容性;通過體外降解實(shí)驗(yàn)觀測1、2、3、4、5、6、7dSF/PCL三維支架的纖維膜剩余重量,分析其降解性能。結(jié)果掃描電鏡（scanning electron microscopy,SEM）下觀察顯示,12h時髁突軟骨細(xì)胞在纖維膜上正常貼壁生長,1d后逐漸分泌大量胞外基質(zhì)。體外降解實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,無細(xì)胞添加組的剩余重量隨降解時間的變化小于細(xì)胞添加組（P<0.05）。結(jié)論 SF/PCL三維支架具有良好的生物相容性和可降解性,該研究為進(jìn)一步研究生物支架修復(fù)軟骨組織損傷或缺損提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 

【文章來源】：華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017,46(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

原理示意圖；Ｂ：高壓靜電紡絲纖維；Ｃ：絲素蛋白／聚己內(nèi)酯三維支架高度；Ｄ：絲素蛋白／聚己內(nèi)酯三維支架寬度圖１高壓靜電紡絲制備ＳＦ／ＰＣＬ三維支架Ａ：高壓靜電紡絲

小球形漸變?yōu)槎嘟切�，軟骨�?xì)胞Ⅱ型膠原免疫組化鑒定如圖２所示，Ⅱ型膠原為軟骨細(xì)胞主要表達(dá)的蛋白，免疫組化染色表現(xiàn)為胞質(zhì)棕黃色，鑒定結(jié)果顯示所取細(xì)胞為軟骨細(xì)胞。２．２生物相容性掃描電鏡觀測結(jié)果如圖３所示，可見髁突軟骨細(xì)胞貼壁粘附于ＳＦ／ＰＣＬ三維支架的纖維膜上，細(xì)胞觸角逐漸伸展。１ｄ時可見軟骨細(xì)胞分泌少量的基質(zhì)并相互連接，３ｄ時可見大量胞外基質(zhì)。提示ＳＦ／ＰＣＬ可供軟骨細(xì)胞正常粘附生長，具有良好的生物相容性。箭頭所指為ＭＣＣｓ陽性染色圖２ＭＣＣｓⅡ型膠原免疫組化染色（×１００）Ｆｉｇ．２ＩｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｔｙｐｅⅡｃｏｌｌａｇｅｎｉｎＭＣＣｓ（×１００）Ａ：１２ｈＭＣＣｓ在ＳＦ／ＰＣＬ纖維上的粘附狀態(tài)（ＳＥＭ，×２０００）；Ｂ：１ｄＭＣＣｓ開始相互連接（ＳＥＭ，×２０００）；Ｃ：３ｄＭＣＣｓ分泌大量胞外基質(zhì)（ＳＥＭ，×２０００）圖３髁突軟骨細(xì)胞在ＳＦ／ＰＣＬ三維支架粘附生長Ｆｉｇ．３ＴｈｅｉｍａｇｅｓｏｆＭＣＣｓａｄｈｅｒｉｎｇｔｏａｎｄｇｒｏｗｉｎｇｏｎＳＦ／ＰＣＬｓｃａｆｆｏｌｄｓ２．３降解性降解實(shí)驗(yàn)溫度為３７℃，ｐＨ為７．４，纖維剩余重量由０．５ｇ逐漸下降，如圖４、表１所示。降解后細(xì)胞添加組的材料剩余重量在７ｄ內(nèi)由０．５ｇ逐漸降解至（０．１１±０．０２）ｇ，無細(xì)胞添加組降解后的剩余重量降為（０．１０±０．０２）ｇ，剩余重量變化結(jié)果見表１。隨培養(yǎng)時間延長，纖維束逐漸斷裂崩解，無細(xì)胞添加組的剩余重量小于細(xì)胞添加組，Ｚ＝

．３統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用ＳＰＳＳ１７．０統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，非正態(tài)分布計量資料，采用Ｗｉｌｃｏｘｏｎ秩和檢驗(yàn)，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ｘ珚±ｓ）表示，以Ｐ＜０．０５為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。２結(jié)果２．１形態(tài)學(xué)觀察倒置顯微鏡下可見髁突軟骨細(xì)胞接種后由小球形漸變?yōu)槎嘟切�，軟骨�?xì)胞Ⅱ型膠原免疫組化鑒定如圖２所示，Ⅱ型膠原為軟骨細(xì)胞主要表達(dá)的蛋白，免疫組化染色表現(xiàn)為胞質(zhì)棕黃色，鑒定結(jié)果顯示所取細(xì)胞為軟骨細(xì)胞。２．２生物相容性掃描電鏡觀測結(jié)果如圖３所示，可見髁突軟骨細(xì)胞貼壁粘附于ＳＦ／ＰＣＬ三維支架的纖維膜上，細(xì)胞觸角逐漸伸展。１ｄ時可見軟骨細(xì)胞分泌少量的基質(zhì)并相互連接，３ｄ時可見大量胞外基質(zhì)。提示ＳＦ／ＰＣＬ可供軟骨細(xì)胞正常粘附生長，具有良好的生物相容性。箭頭所指為ＭＣＣｓ陽性染色圖２ＭＣＣｓⅡ型膠原免疫組化染色（×１００）Ｆｉｇ．２ＩｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｔｙｐｅⅡｃｏｌｌａｇｅｎｉｎＭＣＣｓ（×１００）Ａ：１２ｈＭＣＣｓ在ＳＦ／ＰＣＬ纖維上的粘附狀態(tài)（ＳＥＭ，×２０００）；Ｂ：１ｄＭＣＣｓ開始相互連接（ＳＥＭ，×２０００）；Ｃ：３ｄＭＣＣｓ分泌大量胞外基質(zhì)（ＳＥＭ，×２０００）圖３髁突軟骨細(xì)胞在ＳＦ／ＰＣＬ三維支架粘附生長Ｆｉｇ．３ＴｈｅｉｍａｇｅｓｏｆＭＣＣｓａｄｈｅｒｉｎｇｔｏａｎｄｇｒｏｗｉｎｇｏｎＳＦ／ＰＣＬｓｃａｆｆｏｌｄｓ２．３降解性降解實(shí)驗(yàn)溫度為３７℃，ｐＨ為７．４，纖維剩余重量由０．５ｇ逐漸下降，如圖４、表１


本文編號：3103190