背景:為改善脫細胞基質的力學性能及降解不可控性,前期研究制備了京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠纖維環(huán)組織工程支架。目的:觀察京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠和纖維環(huán)源干細胞的生物相容性,以及京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠的體內降解情況。方法:制備京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠,通過掃描電鏡和接觸角測試儀觀察水凝膠內部結構及表面親水性。將第1代兔纖維環(huán)源干細胞種植于京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠上3 d,行細胞骨架染色,通過倒置免疫熒光顯微鏡和掃描電鏡觀察細胞形態(tài),并繪制細胞生長曲線。將京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠種植于新西蘭大耳白兔肌間隙內,4周后觀察水凝膠降解情況及與周圍組織炎癥反應。結果與結論:京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠支架為多孔網(wǎng)狀結構,接觸角為（39.94±1.61）°;纖維環(huán)源干細胞黏附于京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠支架表面,增殖較快,生長狀態(tài)良好,說明京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠具有良好的生物相容性。種植于兔體內的水凝膠支架在4周后有所降解,周圍肌肉組織有炎癥細胞存在。 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2016,20(21)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

兔纖維環(huán)源干細胞的形態(tài)(倒置顯微鏡，×40)

orphologyofrabbitannulusfibrosus-derivedstemcells(invertedmicroscope,×40)圖注：圖中A為原代培養(yǎng)3d，可見細胞集落形成；B為培養(yǎng)7d，集落增大。圖4兔纖維環(huán)源干細胞在京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠上生長3d后的形態(tài)(掃描電鏡，×2000)Figure4Morphologyofrabbitannulusfibrosus-derivedstemcellsseededongenipincross-linkeddecellularizedannulusfibrosusmatrix/chitosanhydrogelsfor3days(scanningelectronmicroscopy,×2000)圖注：細胞形態(tài)飽滿，平鋪于水凝膠表面，細胞與細胞之間也相互聯(lián)系。圖6京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠在兔體內的降解Figure6Invivodegradationofgenipincross-linkeddecellularizedannulusfibrosusmatrix/chitosanhydrogelsimplantedintorabbits圖注：圖中A為置入兔肌肉4周后，水凝膠在兔體內有所降解；B為置入兔肌肉4周后，蘇木精-伊紅染色見水凝膠周圍有炎癥細胞存在，如中性粒細胞及淋巴細胞等(×100)。1d3d5d7d0.200.150.100.050水凝膠組空白對照組A904mn圖5兔纖維環(huán)源干細胞與京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠復合培養(yǎng)后的細胞增殖曲線Figure5Proliferationcurvesofrabbitannulusfibrosus-derivedstemcellsco-culturedwithgenipincross-linkeddecellularizedannulusfibrosusmatrix/chitosanhydrogels圖2京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠的形態(tài)及表征Figure2Morphologyandcharacterizationofgenipincross-linkeddecellularizedannulusfibrosusmatrix/chitosanhydrogels圖注：圖中A為大體觀，呈膠凍狀；B為水凝膠表面接觸角測試，接觸角為(39.94±1.61)°；C為掃描電鏡觀察水凝膠，內部呈孔洞樣網(wǎng)狀結構(×1000)。組合圖DAPI

劉晨，等.京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠與兔纖維環(huán)源干細胞的生物相容性ISSN2095-4344CN21-1581/RCODEN:ZLKHAH3147www.CRTER.org圖1兔纖維環(huán)源干細胞的形態(tài)(倒置顯微鏡，×40)Figure1Morphologyofrabbitannulusfibrosus-derivedstemcells(invertedmicroscope,×40)圖注：圖中A為原代培養(yǎng)3d，可見細胞集落形成；B為培養(yǎng)7d，集落增大。圖4兔纖維環(huán)源干細胞在京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠上生長3d后的形態(tài)(掃描電鏡，×2000)Figure4Morphologyofrabbitannulusfibrosus-derivedstemcellsseededongenipincross-linkeddecellularizedannulusfibrosusmatrix/chitosanhydrogelsfor3days(scanningelectronmicroscopy,×2000)圖注：細胞形態(tài)飽滿，平鋪于水凝膠表面，細胞與細胞之間也相互聯(lián)系。圖6京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠在兔體內的降解Figure6Invivodegradationofgenipincross-linkeddecellularizedannulusfibrosusmatrix/chitosanhydrogelsimplantedintorabbits圖注：圖中A為置入兔肌肉4周后，水凝膠在兔體內有所降解；B為置入兔肌肉4周后，蘇木精-伊紅染色見水凝膠周圍有炎癥細胞存在，如中性粒細胞及淋巴細胞等(×100)。1d3d5d7d0.200.150.100.050水凝膠組空白對照組A904mn圖5兔纖維環(huán)源干細胞與京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠復合培養(yǎng)后的細胞增殖曲線Figure5Proliferationcurvesofrabbitannulusfibrosus-derivedstemcellsco-culturedwithgenipincross-linkeddecellularizedannulusfibrosusmatrix/chitosanhydrogels圖2京尼平交聯(lián)脫細胞纖維環(huán)基質/殼聚糖水凝膠的形態(tài)及表征Figure2Morphologyandcharacterizationofgenipincross-linkeddecellularizedann

【參考文獻】：
期刊論文
[1]兔纖維環(huán)干細胞與豬脫細胞纖維環(huán)基質的生物相容性[J]. 劉晨,王晟昊,王奕彬,唐雪彬,楊惠林,李斌.  中國組織工程研究. 2014(41)



本文編號：3097060