生物體內(nèi)的活性分子（即:生物檢測(cè)物）在許多生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要作用。而它們的異常表達(dá)也與許多疾病息息相關(guān)。因此,對(duì)于活性分子的檢測(cè)可以有助于疾病的研究以及治療。本論文中,我們構(gòu)建了四類新型的熒光探針,實(shí)現(xiàn)了對(duì)各種活性分子的檢測(cè),并且成功地應(yīng)用于多種疾病的成像。1. 我們首先設(shè)計(jì)合成了一個(gè)基于半花菁染料的近紅外熒光探針（Cy-Azo）用來檢測(cè)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）疾病中的偶氮還原酶（Azo R）。該探針對(duì)Azo R具有高靈敏性和選擇性。該探針首先在兩個(gè)細(xì)胞系（HCT116細(xì)胞和Hep G2細(xì)胞）和三種細(xì)菌（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌）中實(shí)現(xiàn)了Azo R的檢測(cè)。其次,該探針被用于監(jiān)測(cè)急性和慢性UC小鼠中Azo R的活性。這為UC疾病的診斷和治療提供了重要的信息。2. 在UC疾病研究的基礎(chǔ)上,我們研究了UC疾病中出現(xiàn)的“腸-肝軸”機(jī)制。首先,我們合成了一種缺氧敏感型的探針（Cy-AP）。該探針在四個(gè)細(xì)胞系中（Hep G2、HCT116、He La和MCF-7細(xì)胞）實(shí)現(xiàn)了缺氧可視化。然后,該探針可以在肝纖維化小鼠和UC小鼠體內(nèi)監(jiān)測(cè)缺氧情況。最后,該探針可以通過監(jiān)測(cè)缺氧變化來驗(yàn)證生物體... 

【文章來源】：湘潭大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：136 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 前言
    1.2 熒光探針的介紹
        1.2.1 熒光探針的組成
        1.2.2 熒光探針的響應(yīng)機(jī)理
    1.3 熒光探針在生物活性物種中的檢測(cè)
        1.3.1 偶氮還原酶的檢測(cè)
        1.3.2 缺氧的檢測(cè)
        1.3.3 過氧亞硝�；臋z測(cè)
        1.3.4 一氧化碳的檢測(cè)
        1.3.5 還原型輔酶的檢測(cè)
    1.4 本論文的研究工作
第2章 一個(gè)檢測(cè)偶氮還原酶近紅外熒光探針在急性和慢性潰瘍性結(jié)腸炎小鼠中的研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 藥品與儀器
        2.2.2 探針Cy-Azo的合成
        2.2.3 熒光探針的光譜測(cè)定方法
        2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光成像
        2.2.5 細(xì)菌培養(yǎng)和共聚焦熒光成像
        2.2.6 活體成像
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 探針Cy-Azo光譜性能的研究
        2.3.2 選擇性的研究
        2.3.3 pH的研究
        2.3.4 反應(yīng)溫度的研究
        2.3.5 響應(yīng)時(shí)間的研究
        2.3.6 酶動(dòng)力學(xué)的研究
        2.3.7 抑制劑的研究
        2.3.8 響應(yīng)機(jī)理的研究
        2.3.9 活細(xì)胞成像的研究
        2.3.10 細(xì)菌成像的研究
        2.3.11 急性和慢性結(jié)腸炎小鼠成像的研究
    2.4 小結(jié)
第3章 一個(gè)缺氧敏感型近紅外熒光探針用于生物體內(nèi)“腸-肝軸”的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 藥品與儀器
        3.2.2 探針Cy-AP的合成
        3.2.3 熒光探針的光譜測(cè)定
        3.2.4 細(xì)胞共聚焦熒光成像
        3.2.5 活體成像
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 探針Cy-AP光譜性能的研究
        3.3.2 選擇性的研究
        3.3.3 pH的研究
        3.3.4 響應(yīng)時(shí)間的研究
        3.3.5 響應(yīng)機(jī)理的研究
        3.3.6 活細(xì)胞成像的研究
        3.3.7 肝纖維化小鼠和潰瘍性結(jié)腸炎小鼠缺氧的熒光成像研究
        3.3.8 “腸-肝軸”的熒光成像研究
    3.4 小結(jié)
第4章 新型的近紅外熒光平臺(tái)的構(gòu)建以及在生物研究中的應(yīng)用
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 藥品和儀器
        4.2.2 新型染料DDM-R的合成
        4.2.3 熒光探針DDM-ONOO-和DDM-CO的光譜測(cè)定
        4.2.4 細(xì)胞共聚焦熒光成像
        4.2.5 流式細(xì)胞術(shù)分析
        4.2.6 活體成像
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 DDM-R染料的合成及光學(xué)性能的研究
        4.3.2 探針DDM-ONOO-的光譜研究
        4.3.3 選擇性的研究
        4.3.4 響應(yīng)時(shí)間的研究
        4.3.5 pH的研究
        4.3.6 響應(yīng)機(jī)理的研究
        4.3.7 探針DDM-CO的光譜研究
        4.3.8 DDM-CO的選擇性研究
        4.3.9 DDM-CO的時(shí)間響應(yīng)研究
        4.3.10 DDM-CO的 pH響應(yīng)研究
        4.3.11 DDM-CO對(duì) CO的響應(yīng)機(jī)理研究
        4.3.12 細(xì)胞熒光成像研究
        4.3.13 中毒性肝炎小鼠中ONOO-的熒光成像研究
        4.3.14 活體中CO的熒光成像研究
    4.4 小結(jié)
第5章 一個(gè)基于雙鍵重排機(jī)理設(shè)計(jì)的近紅外熒光探針對(duì)細(xì)胞中的NAD（P）H成像研究
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 藥品和儀器
        5.2.2 熒光探針Cy-N的合成
        5.2.3 熒光探針Cy-N的光譜測(cè)定
        5.2.4 細(xì)胞共聚焦熒光成像
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 新型響應(yīng)機(jī)理的提出
        5.3.2 探針Cy-N的光譜研究
        5.3.3 選擇性的研究
        5.3.4 響應(yīng)時(shí)間的研究
        5.3.5 pH的研究
        5.3.6 響應(yīng)機(jī)理的研究
        5.3.7 細(xì)胞熒光成像研究
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄A 實(shí)驗(yàn)藥品
附錄B 實(shí)驗(yàn)儀器
附錄C 部分化合物譜圖
個(gè)人簡(jiǎn)歷、碩士期間研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Update on occult hepatitis B virus infection[J]. Manoochehr Makvandi.  World Journal of Gastroenterology. 2016(39)



本文編號(hào)：3037040