角質細胞生長因子-2（KGF-2）在損傷修復等很多方面都發(fā)揮著很重要的作用,但是KGF-2的應用受到自身生物學特性和外界環(huán)境的影響相當大,在體內應用時蛋白的穩(wěn)定性和生物活性不容易保持,比如37℃時在磷酸鹽緩沖液或生理鹽水中KGF-2的活性還維持不到1h,不能有效發(fā)揮其生物學功能。因此需要有效的生長因子緩釋傳輸途徑解決這一問題,而理想的緩釋載體是關鍵。生物蛋白海綿具有優(yōu)良的生物相容性、生物可降解性、止血性、可吸收性和緩釋性,并可在溫和的條件下加工成各種形狀的載體。其能夠與生長因子以一種簡單、可靠的方式可逆性結合,即固定生長因子,有效保持生長因子活性和緩慢控制釋放,發(fā)揮其促血管生成、創(chuàng)傷修復、抑制疤痕形成等效應。本研究設計利用生物蛋白海綿作為KGF-2的緩釋載體,一方面可以使KGF-2的半衰期延長,在體內發(fā)揮有效作用的時間也相應延長,從而能更好的發(fā)揮其作用；另一方面,生物蛋白海綿復合KGF-2,并不會影響生物蛋白海綿發(fā)揮其自身的優(yōu)勢,從而使兩者均能很好的發(fā)揮作用。目的：制備出KGF-2生物蛋白復合海綿,建立對KGF-2生物蛋白復合海綿體外生物學活性測定的方法,測定KGF-2生物蛋白復合海綿... 

【文章來源】：吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖I-I一股螺旋模型

1.1.2膠原蛋白海綿及其組成膠原蛋白分子是一個長3000A，直徑為15A的桿狀物，是己知的最長蛋白質之一。膠原蛋白分子是由3條大小相似的多膚鏈組成，3條多膚鏈都有螺旋構象(見圖1一1)。3條螺旋互相纏繞，形成一個超螺旋(見圖1一2)。在這個超螺旋中，每個殘基上升2.9A，每一圓周有3.3個殘基。這三股多膚互相以氫鍵形式結合起來[91。圖1一1一股螺旋模型Figurel一 1Single一 strandedhelicaleonformation圖1一2三股螺旋模型Figurel一 2TriPle一 strandedheliealstrueturel

3.1.1提取的膠原蛋白溶液經(jīng)在酸性條件下酶解提取出去端膚膠原蛋白，鹽析后呈透明狀的小塊膠體狀。透析3一5d后，呈白色致密凝膠狀如圖3一1，手觸摸有光滑感，若透析袋裝入量較少，則粘稠性液態(tài)，流動性良好。纓纓纓黝黝黝 :::::顴顴 筆筆筆鬢鬢嘿 嘿蘸蘸 {{{{{夔 夔 夔 圖3一1(a、b)提取的膠原蛋白溶液樣品Fig3一1(a、 b)SamPlesofeollagenProteinsolutionextracted3.1.2膠原蛋白的鑒定(1)蛋白電泳分析膠原蛋白的蛋白電泳分析表明膠原蛋白的相對分子質量較大，膠原蛋白的電泳條帶為3條，在IOOkD附近出現(xiàn)的2條泳帶是膠原蛋白分子a膚鏈的al鏈和a2鏈，在ZO0kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原蛋白分子的p月太鏈，p膚鏈為a肚鏈的二聚體。膠原蛋白的每條多膚鏈相對28


本文編號：3024149