RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)在感染松動假體周圍骨溶解中的作用
發(fā)布時間：2021-01-17 09:36
RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)的失衡已被大量文獻證實與THA術后無菌性松動引起的假體周圍骨溶解密切相關,但感染松動引起的假體周圍骨溶解其發(fā)病機制則鮮見報道。本研究擬通過檢測RANKL/RANK/OPG信號通路在體外細胞和界膜組織中的表達情況,探討RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)是否與感染松動引起假體周圍骨溶解的發(fā)病相關。第一章RANK在巨噬細胞中的表達目的：探討凝血酶和UHMWPE顆粒處理后巨噬細胞中RANK mRNA的表達差異。方法：用佛波酯將U937單核細胞誘導為巨噬細胞,通過細胞形態(tài)學觀察、免疫學標志檢查及體外吞噬功能檢測等方法鑒定是否成功。將UHMWPE顆粒用球磨機研磨后進行其直徑、性質和內毒素含量檢測。將誘導成功的巨噬細胞分別與凝血酶和制備好的UHMWPE顆粒共同培養(yǎng),MTT法檢測凝血酶和UHMWPE顆粒對巨噬細胞的最佳濃度。將巨噬細胞分為細胞+凝血酶組、細胞+UHMWPE顆粒組和單純細胞組（對照組）,實時熒光定量PCR技術檢測RANK mRNA在三種巨噬細胞中的表達差異。結果：U937單核細胞經佛波酯處理后能成功被誘導為巨噬細胞,具備巨噬細胞的形態(tài)特征、表達特異的分化抗原...
【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】：104 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
不同濃度的UHMWPE顆粒對巨嘆細
MTT法測得各實驗組與對照組的細胞存活率(％)見表1-1、表1-2及圖1-7、圖1-8。統(tǒng)計學分析發(fā)現，Img/ml UHMWPE顆粒組巨唾細胞存活率最低(PcO.Ol)，其他兩個實驗組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P〉0.05) ； 50U/ml凝血酶細胞存活率最高（P<0.05)。因此，本研究在隨后的實驗中選擇0.1 mg/mlUHMWPE顆粒和50 U/ml凝血酶與巨睡細胞共培養(yǎng)。表1-1不同濃度的UHMWPE顆粒對巨唆細胞細胞活性的影響（i±s)組別 細胞存活率（％)對照組 100O.Olmg/ml UHMWPE 85.60±7.920.1 mg/ml UHMWPE 89.22±7.281 mg/ml UHMWPE 62.04士4.20表1-1不同農度的凝血酶對巨銀細胞細胞活性的影響（x± S)組別 細胞存活率（％)對照組 10010 U/ml 凝血酶 121.12±3.7150 U/ml 凝血酶 127.52±4.02100 u/ml 凝血酶 84.68±3.4015
基因的Ct值，用法進行換算后進行統(tǒng)計學分析，得到目的基因的相對表達量（RQ值），結果如圖1-9及表1-3。經UHMWPE顆粒處理后的巨噬細胞，其RANK mRNA表達水平RQ值(5.46±1.28 )明顯高于凝血酶處理組（1.69±0.40)和對照組（單純細胞組）(0.11±0.03)，P<0.01o同時凝血酶處理組RANK mRNA表達水平也明顯高于對照組（PO.Ol)，表明經凝血酶、顆粒處理后巨唾細胞中RANK mRNA特異性高表達，特別是經UHMWPE顆粒處理后的巨隨細胞。表1-3經不同處理后巨嗟細胞中RANK mRNA的表達水平組別 RANK mRNA的RQ值凝血酶處理組 1.69±0.40顆粒處理組 5.46±1.28對照組 0.11±0.0316
【參考文獻】：
期刊論文
[1]一種高效的巨噬細胞體外誘導培養(yǎng)方法[J]. 張春蕾,華正宇,袁小林,楊真,張青,李小歡. 大連醫(yī)科大學學報. 2011(05)
[2]顯微拉曼光譜用于研究大氣單顆粒表面非均相反應[J]. 趙德峰,朱彤,陳琦,劉穎君,張澤鋒. 中國科學:化學. 2010(12)
[3]細胞因子信號轉導抑制蛋白在JAK/STAT信號通路中的負反饋調節(jié)作用[J]. 李敏利,朱人敏. 醫(yī)學研究生學報. 2009(03)
[4]松動的人工髖關節(jié)界膜的研究[J]. 馬建兵,劉淼,姚建鋒,張育民. 中國矯形外科雜志. 2009(06)
[5]人工關節(jié)置換術后人工關節(jié)松動的原因[J]. 杜開利,馬若凡,丁悅. 中華關節(jié)外科雜志(電子版). 2007(03)
[6]超高分子量聚乙烯顆粒對巨噬細胞影響的實驗研究[J]. 毛遠青,朱振安,湯亭亭,李宏斌. 中華外科雜志. 2006(12)
[7]巨噬細胞對聚乙烯和鈦合金顆粒吞噬反應的差異性[J]. 毛遠青,朱振安,湯亭亭,王曉慶,袁振,劉銘. 上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2006(05)
[8]金黃色葡萄球菌不同培養(yǎng)與反應條件對其血漿凝固酶的影響[J]. 劉真真,林濤,李光偉,楊雪嬌,黃偉. 檢驗檢疫科學. 2005(05)
[9]不同材料人工關節(jié)磨損顆粒對假體——骨界面骨形成影響的比較研究[J]. 蔡谞,王繼芳,盧世璧,趙斌,張笑明,侯寧. 中國生物醫(yī)學工程學報. 2003(06)
本文編號：2982621
【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】：104 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
不同濃度的UHMWPE顆粒對巨嘆細
MTT法測得各實驗組與對照組的細胞存活率(％)見表1-1、表1-2及圖1-7、圖1-8。統(tǒng)計學分析發(fā)現，Img/ml UHMWPE顆粒組巨唾細胞存活率最低(PcO.Ol)，其他兩個實驗組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P〉0.05) ； 50U/ml凝血酶細胞存活率最高（P<0.05)。因此，本研究在隨后的實驗中選擇0.1 mg/mlUHMWPE顆粒和50 U/ml凝血酶與巨睡細胞共培養(yǎng)。表1-1不同濃度的UHMWPE顆粒對巨唆細胞細胞活性的影響（i±s)組別 細胞存活率（％)對照組 100O.Olmg/ml UHMWPE 85.60±7.920.1 mg/ml UHMWPE 89.22±7.281 mg/ml UHMWPE 62.04士4.20表1-1不同農度的凝血酶對巨銀細胞細胞活性的影響（x± S)組別 細胞存活率（％)對照組 10010 U/ml 凝血酶 121.12±3.7150 U/ml 凝血酶 127.52±4.02100 u/ml 凝血酶 84.68±3.4015
基因的Ct值，用法進行換算后進行統(tǒng)計學分析，得到目的基因的相對表達量（RQ值），結果如圖1-9及表1-3。經UHMWPE顆粒處理后的巨噬細胞，其RANK mRNA表達水平RQ值(5.46±1.28 )明顯高于凝血酶處理組（1.69±0.40)和對照組（單純細胞組）(0.11±0.03)，P<0.01o同時凝血酶處理組RANK mRNA表達水平也明顯高于對照組（PO.Ol)，表明經凝血酶、顆粒處理后巨唾細胞中RANK mRNA特異性高表達，特別是經UHMWPE顆粒處理后的巨隨細胞。表1-3經不同處理后巨嗟細胞中RANK mRNA的表達水平組別 RANK mRNA的RQ值凝血酶處理組 1.69±0.40顆粒處理組 5.46±1.28對照組 0.11±0.0316
【參考文獻】：
期刊論文
[1]一種高效的巨噬細胞體外誘導培養(yǎng)方法[J]. 張春蕾,華正宇,袁小林,楊真,張青,李小歡. 大連醫(yī)科大學學報. 2011(05)
[2]顯微拉曼光譜用于研究大氣單顆粒表面非均相反應[J]. 趙德峰,朱彤,陳琦,劉穎君,張澤鋒. 中國科學:化學. 2010(12)
[3]細胞因子信號轉導抑制蛋白在JAK/STAT信號通路中的負反饋調節(jié)作用[J]. 李敏利,朱人敏. 醫(yī)學研究生學報. 2009(03)
[4]松動的人工髖關節(jié)界膜的研究[J]. 馬建兵,劉淼,姚建鋒,張育民. 中國矯形外科雜志. 2009(06)
[5]人工關節(jié)置換術后人工關節(jié)松動的原因[J]. 杜開利,馬若凡,丁悅. 中華關節(jié)外科雜志(電子版). 2007(03)
[6]超高分子量聚乙烯顆粒對巨噬細胞影響的實驗研究[J]. 毛遠青,朱振安,湯亭亭,李宏斌. 中華外科雜志. 2006(12)
[7]巨噬細胞對聚乙烯和鈦合金顆粒吞噬反應的差異性[J]. 毛遠青,朱振安,湯亭亭,王曉慶,袁振,劉銘. 上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2006(05)
[8]金黃色葡萄球菌不同培養(yǎng)與反應條件對其血漿凝固酶的影響[J]. 劉真真,林濤,李光偉,楊雪嬌,黃偉. 檢驗檢疫科學. 2005(05)
[9]不同材料人工關節(jié)磨損顆粒對假體——骨界面骨形成影響的比較研究[J]. 蔡谞,王繼芳,盧世璧,趙斌,張笑明,侯寧. 中國生物醫(yī)學工程學報. 2003(06)
本文編號：2982621
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