目的:探索基于靜電紡絲技術(shù)制備以自體廢棄血液為材料構(gòu)建組織工程生物支架薄膜的方法,評價支架材料的特性及生物相容性,探討其作為組織工程支架材料的可行性。方法:將術(shù)中自體廢棄血液通過固液分離、離心、純化、干燥等步驟提純出纖維蛋白原,經(jīng)靜電紡絲技術(shù)制作成纖維蛋白原支架薄膜。觀察不同纖維蛋白原濃度所得電紡支架的大體形態(tài),掃描電鏡觀察材料的三維結(jié)構(gòu),通過檢測體外降解率、親水性能、表面粗糙度等測定支架材料的特性;與人骨髓間充質(zhì)干細胞進行體外共培養(yǎng),通過檢測細胞活性、細胞增殖率等評價該支架材料的生物相容性;通過動物體內(nèi)實驗觀察材料對皮損的修復情況。結(jié)果:以自體廢棄血液為材料的組織工程生物支架成膜性良好,纖維結(jié)構(gòu)清晰可見,經(jīng)掃描電鏡可見以130 mg/ml組的濃度下的電紡支架纖維直徑較為均勻、孔隙大小一致的縱橫交錯的纖維結(jié)構(gòu),細胞在支架材料中生長良好并分泌較多的細胞基質(zhì);各組接觸角測試均小于90°;將人骨髓間充質(zhì)干細胞與支架材料共培養(yǎng)后向成骨和成軟骨方向分化,經(jīng)特異性染色效果較明顯;細胞增殖實驗證明細胞隨著天數(shù)的增加呈增長趨勢;DAPI染色和Live/dead實驗證明支架材料有良好的生物相容性。結(jié)論:廢棄血液是一種主要的醫(yī)院廢棄物,處理廢棄血液需要耗費大量資源,本研究在短時間內(nèi)從廢棄血液中成功電紡制作成固態(tài)三維結(jié)構(gòu)樣物質(zhì),研究成果初步表明該方法及材料在組織工程領(lǐng)域中有極大的發(fā)展?jié)摿?其良好的生物相容性及物理特性還可能使其成為皮膚創(chuàng)傷和骨誘導膜技術(shù)等應(yīng)用的理想選擇。
【學位單位】：貴州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R318.08
【部分圖文】：

細不均并有大量液滴狀結(jié)構(gòu)；B 組可見排列有序的多層纖維結(jié)構(gòu)，纖維直徑、孔徑大小接近一致，少量液滴狀結(jié)構(gòu)；C 組未見纖維結(jié)構(gòu)。圖2 掃描電鏡觀察A、B、C三組微觀纖維結(jié)構(gòu)（×8000）Fig. 2 Scanning electron microscopy A, B, C three groups of micro-fiberstructure (× 8000)2.3 低溫噴霧干燥技術(shù)處理后電紡時泰勒錐結(jié)構(gòu)圖 3 經(jīng)低溫噴霧干燥技術(shù)處理后的纖維蛋白原材料在電場下形成的泰勒錐結(jié)構(gòu)A B C

描電鏡觀察通過掃描電鏡觀察電紡后的支架可見（圖 2）：A 組可見纖維結(jié)構(gòu)均并有大量液滴狀結(jié)構(gòu)；B 組可見排列有序的多層纖維結(jié)構(gòu)，纖維小接近一致，少量液滴狀結(jié)構(gòu)；C 組未見纖維結(jié)構(gòu)。圖2 掃描電鏡觀察A、B、C三組微觀纖維結(jié)構(gòu)（×8000）Fig. 2 Scanning electron microscopy A, B, C three groups of micro-structure (× 8000)溫噴霧干燥技術(shù)處理后電紡時泰勒錐結(jié)構(gòu)

12圖1 三組血液干燥后的大體觀Fig. 1 The general view of three groups of fibrinogen after drying2.2 掃描電鏡觀察通過掃描電鏡觀察電紡后的支架可見（圖 2）：A 組可見纖維結(jié)構(gòu)，纖維粗細不均并有大量液滴狀結(jié)構(gòu)；B 組可見排列有序的多層纖維結(jié)構(gòu)，纖維直徑、孔徑大小接近一致，少量液滴狀結(jié)構(gòu)；C 組未見纖維結(jié)構(gòu)。圖2 掃描電鏡觀察A、B、C三組微觀纖維結(jié)構(gòu)（×8000）Fig. 2 Scanning electron microscopy A, B, C three groups of micro-fiberstructure (× 8000)2.3 低溫噴霧干燥技術(shù)處理后電紡時泰勒錐結(jié)構(gòu)圖

【參考文獻】

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本文編號：2825356