【摘要】：Anillin是細胞內(nèi)一種重要的腳手架蛋白和調(diào)節(jié)因子,作用于細胞的整個周期,與肌動蛋白纖維(F-actin),肌球蛋白II,Rho A以及隔膜蛋白等多種蛋白相互連接、相互作用。細胞內(nèi)的Anillin維持一個適當?shù)钠胶馐潜匾?Anillin過量表達會增加癌細胞的遷移能力或者導(dǎo)致局灶性節(jié)段性腎小球硬化,而太少或者不表達Anillin則會擾亂分裂細胞的收縮環(huán)和細胞膜的完整性。同時,細胞表面彈性模量等力學(xué)特性又是區(qū)別癌細胞的重要指標。因此,研究Anillin對細胞骨架蛋白和力學(xué)特性的調(diào)節(jié)作用,能夠為癌癥等病癥的臨床診斷與治療提供有價值的參考。本文主要研究的是Anillin的缺失對細胞骨架蛋白和細胞力學(xué)特性的影響。使用RNA干擾技術(shù)篩選獲得了Anillin RNA穩(wěn)定敲降的Hela細胞株,并轉(zhuǎn)入mCherry-肌球蛋白II A熒光蛋白。分別利用熒光漂白恢復(fù)(FRAP),線熒光強度分析等方法測定細胞內(nèi)肌球蛋白IIA沿細胞長軸的分布和轉(zhuǎn)運速率;熒光染色檢測肌動蛋白纖維分布特征;采用原子力顯微鏡測定細胞不同位置的表面彈性模量和長軸邊緣區(qū)域的破膜力。結(jié)果如下:(1)Anillin缺失會導(dǎo)致細胞內(nèi)肌球蛋白II長軸末端分布減少,轉(zhuǎn)運速率變慢;(2)肌動蛋白在細胞邊緣聚集但無明顯規(guī)則排列的肌動蛋白纖維,胞體中的肌動蛋白纖維無沿長軸分布的特征;(3)Anillin敲降細胞的表面彈性模量明顯增大,但長軸邊緣破膜力并無明顯差別。本文的結(jié)果表明:Anillin主要通過作用于細胞邊緣的骨架結(jié)構(gòu)與分布對胞內(nèi)進行區(qū)域性調(diào)節(jié),這種結(jié)果對應(yīng)著細胞表面彈性模量分布的特征,但是不顯著影響破膜力。Anillin通過與骨架蛋白、細胞表面彈性模量共同作用影響著細胞-細胞相互作用、極性建立等生理活動。
【學(xué)位授予單位】：太原理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R318.01

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