發(fā)布時間：2019-09-25 09:57

【摘要】：在生命過程中,機體產生許多含氧物質,包括活性氧、活性硫等。過氧化氫作為一種重要的活性氧分子,參與人體的各種生理過程。但是,過量的H_2O_2會誘導多種疾病,如癌癥、動脈硬化等。在本文中,我們研究了一種近紅外(NIR)比率型雙光子熒光探針(BC)檢測生物體系中H_2O_2。探針BC采用氧雜蒽基團作為一種新型的反應位點并顯現(xiàn)出近紅外發(fā)射。當探針與H_2O_2響應,探針BC釋放出一個雙光子染料,并表現(xiàn)出非常大的發(fā)射位移為221 nm,從而更加精確的測量出峰值強度和比率。BC探針在長時間暴露于NO中,熒光光譜幾乎沒有影響,對親電分子如H_2S、半胱氨酸或GSH幾乎沒有反應。半胱氨酸是重要的半必需氨基酸之一,常參與多種酶促反應,具有多種生物學功能。在此,我們提出了一個靈敏度高和選擇性好的紅色熒光探針RCys檢測活細胞和動物體內的Cys。RCys利用羅丹明衍生物作為熒光平臺,并采用丙烯酸酯為半胱氨酸反應位點。當RCys與Cys響應時,觀察到一個紅色熒光在638 nm處。RCys與Cys發(fā)生熒光反應的時間很短,并對Cys表現(xiàn)出良好的選擇性,相比其他硫醇包括谷胱甘肽和半胱氨酸。巰基化合物是細胞中的重要分子,參與多種生理活動,例如,在損傷和氧化應激反應中作為抗氧化劑;用于與金屬結合的螯合劑;作為信使分子等發(fā)揮著重要作用。硫化氫,最簡單的生物硫醇,在人類自身的酶和非酶過程中產生。硫化氫可誘導腫瘤細胞增殖呈濃度依賴性,與腫瘤生長密切相關。實時監(jiān)測硫化氫水平對了解其在腫瘤細胞增殖和腫瘤診中的作用是非常重要的。實驗中,我們選擇生物素作為癌細胞特異性組,疊氮基作為H_2S的反應位點。由于生物素基團對癌細胞的定位作用,BN-H_2S可成功地用于癌細胞中H_2S的雙光子成像。
【圖文】：

圖 1.4-2 共軛聚合物 H2O2探針的結構示意圖膦在與 H2O2反應時產生二苯基氧化膦，因此，它作為一種方法探針中。利用這一現(xiàn)象，Imato 課題組設計了一種具有選擇性圖 1.5）。在不存在過氧化氫情況下，該探針在 PBS 緩沖溶液（熒光。由于電子供體二苯基膦中的電子向 7-羥基香豆素中發(fā)生光滅熒光。加入 H2O2時，探針的熒光強度發(fā)生了 20 倍的響應，，生氧化生成了供電子能力降低的二苯基氧化膦。可以發(fā)現(xiàn)探針的濃度之間存在一個很好的線性關系。由于在相同的條件下，加入會出現(xiàn)強烈的熒光，表明探針 6 對 H2O2選擇性較差。

圖 1.16 硫化氫在人體生理學中的作用圖水平，H2S 具有獨特的化學特性，作為一種良好的還原劑和親有助于闡明其信號能力，比如最近研究的親電試劑 8-nitro-cGM硫醇反應，產生活性過硫化物，以及與金屬中心發(fā)生互動可逆化學反應性，H2S 的信號作用是多種多樣的，范圍從氧化傳感室的研究表明，包括斯奈德和唐課題組，表明半胱氨酸殘基改變某些酶的潛力，包括蛋白酪氨酸磷酸酶和 ATP 敏感鉀通道究表明，RSS 如硫烷硫，以及硫化氫的其他物種的代謝，可簡單的硫醇會有不同的生理作用�；钚孕》肿釉谏矬w內的含量不確定，所以在生物體內可以檢關注的焦點。因此，開發(fā)新技術，以更好地研究細胞、組織及 RSS，以確定這些活性物質在生理和病理學中的更好應用。
【學位授予單位】：濟南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R318;O657.3

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本文編號：2541380