富含血小板血漿聯(lián)合細(xì)胞膜片技術(shù)構(gòu)建可注射組織工程軟骨
發(fā)布時間:2019-08-14 06:52
【摘要】:自體軟骨細(xì)胞移植(Autologous chondrocyte transplantation, ACT)已經(jīng)成功的應(yīng)用于關(guān)節(jié)軟骨缺損的臨床治療。然而,傳統(tǒng)的手術(shù)方法會不可避免的給患者帶來二次傷害。可注射生物降解支架材料的出現(xiàn)為體內(nèi)軟骨組織再生提供了令人滿意的治療平臺,因為它不受缺損形狀的限制,并且可以通過微創(chuàng)手術(shù)實現(xiàn)組織修復(fù)。人們已經(jīng)對富含血小板血漿(Platelet-rich Plasma, PRP)凝膠應(yīng)用于結(jié)締組織再生進(jìn)行了廣泛的研究,其良好的生物相容性和易獲得的優(yōu)點使它成為組織工程中極具前景的細(xì)胞治療載體。但是,PRP凝膠也存在著諸如機(jī)械性能較差和體內(nèi)快速降解的缺點,這會導(dǎo)致修復(fù)組織收縮、形變,使軟骨再生受到限制。 實驗?zāi)康模涸谶@項研究中,我們使用PRP和顆;能浌羌(xì)胞膜片(Chondrocyte Bricks,CB),以及細(xì)胞為材料,提出一種新的構(gòu)建可注射組織工程軟骨的策略。我們期望Chondrocyte Bricks能夠改善PRP的機(jī)械性能,形成具有穩(wěn)定外形和均一組織結(jié)構(gòu)的軟骨組織。 方法和結(jié)果: 1.將PRP、Chondrocyte Bricks (CB)和軟骨細(xì)胞混合,注射到裸鼠背部皮下。8周后觀察移植物形態(tài),并對該組織工程化軟骨特性進(jìn)行分析。大體觀察和組織學(xué)檢查顯示,使用PRP-CB與軟骨細(xì)胞能夠構(gòu)建出形態(tài)穩(wěn)定、結(jié)構(gòu)均一的可注射組織工程軟骨。提出PRP-CB模型。 2.使用MSCs替代軟骨細(xì)胞進(jìn)行同樣實驗。結(jié)果顯示,外圍的MSCs發(fā)生骨化,內(nèi)部的MSCs最終分化為脂肪組織,PRP-MSCs Bricks模型并不能形成軟骨組織。 3.使用PRP-CB為內(nèi)支架,以MSCs為種子細(xì)胞,注射到裸鼠背部皮下,分別于2周、周、8周觀察MSCs向軟骨細(xì)胞方向分化的程度,并以PRP-軟骨細(xì)胞外基質(zhì)顆粒(PRP-ECM Bricks)為對照,探討微環(huán)境對MSCs軟骨向分化的影響。結(jié)果顯示PRP-CB模型能夠誘導(dǎo)MSCs向軟骨細(xì)胞分化并能夠維持表型。 4.使用PRP-CB-MSCs對兔關(guān)節(jié)軟骨缺損進(jìn)行修復(fù),觀察該方法對關(guān)節(jié)軟骨缺損的功能性修復(fù)。組織學(xué)檢查證明,該方法能夠促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨修復(fù),產(chǎn)生新的軟骨組織。 結(jié)論:PRP-CB模型能夠維持可注射軟骨的外部形態(tài),所形成的內(nèi)部結(jié)構(gòu)營造了適合于軟骨細(xì)胞生長的微環(huán)境,它能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)MSCs向軟骨方向分化形成新生軟骨,并阻止外部血管侵入,維持軟骨細(xì)胞表型。該模型為構(gòu)建可注射組織工程軟骨提供了新的策略。
【學(xué)位授予單位】:西北大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R318.17
本文編號:2526388
【學(xué)位授予單位】:西北大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R318.17
【共引文獻(xiàn)】
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1 趙明;馮剛;;關(guān)節(jié)軟骨退行性變的細(xì)胞治療研究進(jìn)展[J];四川醫(yī)學(xué);2012年05期
2 劉尚侖;董睿;馬勇;;組織工程化軟骨構(gòu)建的研究進(jìn)展[J];中國組織工程研究;2012年46期
,本文編號:2526388
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