發(fā)布時間：2019-02-18 13:30

【摘要】：[目的]通過研究大耳白兔外周血來源的血管內(nèi)皮祖細胞(BP-EPCs)對骨髓來源間充質(zhì)干細胞(BMSCs)體外增殖和分化能力的影響,篩選更有潛力兩種細胞共培養(yǎng)系統(tǒng)從而為構(gòu)建組織工程骨的基礎(chǔ)研究和臨床治療提供更多的資料支持。[方法]通過密度梯度離心法結(jié)合貼壁法分離純化兔EPCs和BMSCs,實驗分兩組:PB-EPCs和BMSCs間接共培養(yǎng)組中BMSCs為實驗組,單獨BMSCs組為對照組。觀察兩組細胞形態(tài)。對兩組第三代細胞進行成骨和成脂誘導并評估兩組BMSCs分化能力。[結(jié)果]兩組細胞體外培養(yǎng)形態(tài)規(guī)則,增殖能力強,生長曲線呈S型。其中兔EPCs和BMSCs間接共培養(yǎng)組較BMSCs單獨培養(yǎng)組細胞增長速度更快,兩組差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。經(jīng)成骨誘導后,間接共培養(yǎng)組BMSCs出現(xiàn)鈣結(jié)節(jié)時間早且茜素紅染色較深,堿性磷酸酶和骨鈣素分泌量較單獨BMSCs組顯著增高,兩組差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。經(jīng)成脂誘導后,間接共培養(yǎng)組油紅O染色較深,兩組差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。[結(jié)論]兔EPCs和BMSCs間接共培養(yǎng)組細胞在增殖速度和分化能力方面均優(yōu)于BMSCs單獨培養(yǎng)組,提示將BP-EPCs和BMSCs共培養(yǎng)系統(tǒng)作為種子細胞構(gòu)建組織工程骨有更大的使用潛能。
[Abstract]:[objective] to study the effect of vascular endothelial progenitor cells (BP-EPCs) from peripheral blood of white rabbits on the proliferation and differentiation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSCs) in vitro. Screening of two cell coculture systems has more potential to provide more data for the basic research and clinical treatment of tissue engineering bone. [methods] EPCs and BMSCs, were isolated and purified by density gradient centrifugation combined with adherent method. The two groups were divided into two groups: in the PB-EPCs and BMSCs coculture group, BMSCs was used as the experimental group and the BMSCs group as the control group. Cell morphology was observed in both groups. The third generation cells were induced by osteogenesis and adipogenesis and the differentiation ability of BMSCs was evaluated. [results] the cells of the two groups were cultured in vitro with regular morphology, strong proliferative ability and S-shaped growth curve. The rate of cell growth in EPCs and BMSCs indirect co-culture group was faster than that in BMSCs alone group, and the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). After osteogenesis induction, BMSCs in indirect co-culture group appeared calcium nodule earlier and alizarin red staining was deeper, alkaline phosphatase and osteocalcin secretion were significantly higher than those in BMSCs group, the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). After fat-forming induction, indirect co-culture group oil red O staining was deeper, the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). [conclusion] the proliferation rate and differentiation ability of rabbit EPCs and BMSCs indirect co-culture group were better than that of BMSCs alone group, suggesting that BP-EPCs and BMSCs co-culture system could be used as seed cells to construct tissue engineered bone.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院整形外科;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81460298):《功能性微血管化自體生物骨動態(tài)追蹤及基因篩選》
【分類號】：R687;R318.08

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