【摘要】：目的 本實(shí)驗(yàn)旨在通過觀察不同孔徑絲素蛋白支架在SD大鼠體內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)的降解情況,初步了解不同孔徑絲素蛋白材料在體內(nèi)降解過程中的形態(tài)學(xué)特點(diǎn),研究絲素蛋白材料的結(jié)構(gòu)對(duì)其體內(nèi)降解的影響,為深入研究絲素蛋白材料體內(nèi)降解的可控性奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 材料與方法 1.制備三種絲素蛋白膜,平均孔徑分別為20±1.5μm(SF-1).100士8μm(SF-2).200±15μm(SF-3),平均孔隙率分別為86.8±0.2％(SF-1).92.4±0.1％(SF-2).96.6±0.1％(SF-3),掃描電鏡觀察其表面結(jié)構(gòu)。 2.選用體重相當(dāng)?shù)腟D大鼠,全麻下在其脊柱兩側(cè)共作3個(gè)長(zhǎng)約1cm的小切口,潛行分離,每只SD大鼠形成3個(gè)皮下囊狀腔隙,隨機(jī)分別植入SF-1、SF-2、SF-3。 3.術(shù)后選取2,6,12,18,24及30周六個(gè)觀測(cè)時(shí)間點(diǎn),隨機(jī)取材,分別進(jìn)行大體觀察、組織病理切片HE染色、Masson染色、掃描電子顯微鏡觀察。 結(jié)果 1.大體標(biāo)本觀察可見,SD大鼠術(shù)區(qū)均無感染、壞死,傷口愈合好。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,SF-1與周圍組織輕度粘連,易于分離,材料體積及外形無明顯變化；SF-2術(shù)后第6周開始發(fā)現(xiàn)材料變薄,部分降解,從12周到30周材料與周圍皮下組織粘連緊密,30周降解約40%；SF-3術(shù)后第2周出現(xiàn)降解,12周降解約50%,24周時(shí)基本找不到單純材料存在,30周已完全降解。 2.組織病理切片HE染色： SF-1：術(shù)后2周,材料表面可見巨噬細(xì)胞及較多中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),術(shù)后6周開始炎性細(xì)胞明顯減少,在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中絲素蛋白支架與周圍組織界限清楚,內(nèi)部未見組織長(zhǎng)入。 SF-2：術(shù)后2周,材料表面發(fā)現(xiàn)有成纖維細(xì)胞浸潤(rùn)生長(zhǎng),周圍組織呈增生性改變.可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn),以淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞為主,偶可見新生血管形成。隨著時(shí)間延長(zhǎng),炎性細(xì)胞減少,成纖維細(xì)胞增多,同時(shí)可見血管、組織細(xì)胞進(jìn)一步長(zhǎng)入材料。 SF-3：術(shù)后2周與SF-2在2周時(shí)表現(xiàn)基本相同,但材料表面組織細(xì)胞浸潤(rùn)較深：術(shù)后6周,材料內(nèi)部部分區(qū)域嗜伊紅染色消失,支架結(jié)構(gòu)有崩解現(xiàn)象,炎性細(xì)胞明顯減少,可見較多血管及成纖維細(xì)胞,成纖維細(xì)胞等組織細(xì)胞逐漸深入材料內(nèi)部生長(zhǎng)；術(shù)后12周,可見較多成熟血管及成纖維細(xì)胞,材料邊緣部分區(qū)域支架結(jié)構(gòu)崩解現(xiàn)象較前明顯,出現(xiàn)較大孔徑,但內(nèi)部變化不大,組織細(xì)胞進(jìn)一步長(zhǎng)入材料,但組織增生現(xiàn)象仍較明顯；術(shù)后18周與12周所見基本相同,組織細(xì)胞進(jìn)一步長(zhǎng)入材料；術(shù)后24周,材料支架結(jié)構(gòu)完全崩解,見不到正常材料結(jié)構(gòu),組織細(xì)胞與剩余材料混合存在,無明細(xì)界限。 3. Masson三色染色：SF-1周圍組織纖維化,整個(gè)觀察周期內(nèi)未見膠原纖維長(zhǎng)入材料內(nèi)部；SF-2在18周時(shí)可見較多膠原纖維深入材料內(nèi)部,30周時(shí)可見整個(gè)殘余材料被膠原纖維包繞；SF-3在2周時(shí)可見邊緣結(jié)構(gòu)模糊,周圍被膠原纖維包繞,6周時(shí)可見大量膠原纖維組織深入內(nèi)部生長(zhǎng),血管豐富,24周時(shí)可見大量膠原纖維將殘余絲素蛋白支架分區(qū)包繞。 4.掃描電子顯微鏡(SEM)觀察：SF-1在18周時(shí)可見表面出現(xiàn)孔徑塌陷,但直到30周,未觀察到材料斷面結(jié)構(gòu)有新的變化；SF-2在2周時(shí)材料孔內(nèi)出現(xiàn)組織細(xì)胞,12周時(shí)孔徑變大,部分孔徑塌陷,較多組織細(xì)胞長(zhǎng)入,24周時(shí)整個(gè)斷面結(jié)構(gòu)塌陷；SF-3在2周時(shí)表面可見片狀材料碎屑及孔徑塌陷,局部孔徑增大,斷面結(jié)構(gòu)未見明顯變化,12周表面孔徑完全塌陷,可見較多組織細(xì)胞長(zhǎng)入,24周時(shí)已找不到正常材料結(jié)構(gòu)。 結(jié)論 1.不同孔徑、孔隙率的絲素蛋白支架體內(nèi)降解速率不同。 2.三種絲素蛋白支架體內(nèi)降解速率SF-3SF-2SF-1。 3.植入早期絲素蛋白支架主要被炎性細(xì)胞及成纖維細(xì)胞浸潤(rùn),晚期主要為成纖維細(xì)胞,并可見膠原纖維包繞、長(zhǎng)入材料。
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【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2400215