本文關(guān)鍵詞：重組人源膠原蛋白Ⅲ組織工程支架的制備及性能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南京理工大學(xué)》 2014年

重組人源膠原蛋白Ⅲ組織工程支架的制備及性能研究

唐啟偉  

【摘要】：膠原蛋白由于其良好的生物學(xué)特性已成為組織工程常用的載體材料。本研究所用重組人源膠原蛋白是通過(guò)基因工程法設(shè)計(jì)膠原蛋白基因序列,而后進(jìn)行翻譯所生產(chǎn)的具有人膠原蛋白特征的蛋白質(zhì),與從動(dòng)物體提取的膠原蛋白相比,具有親水性、無(wú)病毒隱患的優(yōu)點(diǎn),且易于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn),在組織工程支架材料的研究中有良好的應(yīng)用前景。但是單一成分作為生物支架時(shí)都不能滿(mǎn)足支架的要求,本文利用重組人源膠原蛋白Ⅲ與殼聚糖復(fù)合,采用戊二醛交聯(lián)的方法來(lái)制備重組人源膠原蛋白Ⅲ/殼聚糖三維海綿支架,并對(duì)支架理化性質(zhì)及細(xì)胞相容性進(jìn)行初步研究。其相關(guān)研究結(jié)果如下。 1.本文首先利用構(gòu)建的畢赤酵母基因工程菌通過(guò)高密度發(fā)酵生產(chǎn)重組人源膠原蛋白(RHSC),采用SDS-PAGE、質(zhì)譜、氨基酸組分分析及紅外光譜等方法對(duì)目的蛋白進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)RHSC是一種胞外分泌型產(chǎn)物,其單體分子量約56kD,二聚體分子量為單體的二倍,一級(jí)結(jié)構(gòu)與所設(shè)計(jì)目的基因相符合,并與SigmaⅢ型膠原蛋白具有相似的結(jié)構(gòu)特征。 2.探究重組人源膠原蛋白Ⅲ/殼聚糖支架的制備工藝。將重組人源膠原蛋白Ⅲ和殼聚糖按質(zhì)量比5：1,3：1,1：1,1：3,1：5混合,利用戊二醛進(jìn)行交聯(lián),通過(guò)真空冷凍干燥法制備復(fù)合多孔支架。考察了支架的形貌特征、孔徑大小、孔隙率、吸水率、降解率、熱穩(wěn)定性等理化性質(zhì)。結(jié)果顯示,制備的支架孔徑在20-50μm,孔隙率都在93%以上,殼聚糖的加入顯著改善了支架的降解性能。綜合各項(xiàng)理化性能結(jié)果,按照1：1配比制備的支架孔徑分布均勻,支架內(nèi)部孔隙交聯(lián)度高,吸水率和降解率較為合適,熱分解溫度達(dá)到249.29℃,符合生物材料的基本要求。 3.利用不同濃度戊二醛交聯(lián)制備支架,發(fā)現(xiàn)用0.05%的戊二醛進(jìn)行交聯(lián)制備的支架呈均勻分布的多孔結(jié)構(gòu),孔隙豐富,且交聯(lián)度高,在生理鹽水中穩(wěn)定較好�？紤]選用終濃度為0.05%的戊二醛作為交聯(lián)劑,來(lái)制備殼聚糖/重組膠原復(fù)合支架。 4.將重組人源膠原蛋白Ⅲ和殼聚糖按1：1的配比,0.05%的戊二醛交聯(lián)并制備其支架浸提液,通過(guò)AO/EB染色,MTT實(shí)驗(yàn),初步探討了其對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞的生物相容性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)其支架浸提液細(xì)胞毒性小,基本不影響細(xì)胞的生長(zhǎng)活性,從側(cè)面反映了支架具有良好的細(xì)胞相容性,有望應(yīng)用于皮膚組織工程。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南京理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08
【目錄】：

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王菊華;新型功能性竹漿纖維的制備及結(jié)構(gòu)與性能的研究[D];蘇州大學(xué);2008年

2 景森;魔芋葡甘聚糖及其膠原蛋白、殼聚糖共混膜的研究[D];昆明理工大學(xué);2007年

3 唐啟偉;重組人源膠原蛋白Ⅲ組織工程支架的制備及性能研究[D];南京理工大學(xué);2014年

4 錢(qián)曼;魚(yú)鱗膠原蛋白的提取及膠原海綿的制備研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

5 陸瑞欣;神經(jīng)干細(xì)胞在膠原凝膠及膠原—?dú)ぞ厶侵Ъ軆?nèi)的培養(yǎng)[D];大連理工大學(xué);2009年

6 何蘭;牛骨膠原蛋白的提取及復(fù)合海綿的制備研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

7 司鐘;膠原蛋白與聚乙烯醇復(fù)合紡絲性能的研究[D];北京服裝學(xué)院;2012年

8 徐新宇;組織工程應(yīng)用的膠原蛋白制備與改性研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

9 臧傳鋒;真絲纖維經(jīng)膠原蛋白處理后的結(jié)構(gòu)和性能研究[D];蘇州大學(xué);2006年

10 賈光;＋Gz重復(fù)暴露對(duì)大鼠腰椎間盤(pán)的膠原蛋白分布的影響[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

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本文編號(hào)：184053