國產(chǎn)多孔鉭對成骨細胞生物相容性及其相關(guān)成骨基因表達的影響
本文選題:多孔鉭 切入點:成骨細胞 出處:《第三軍醫(yī)大學學報》2014年11期
【摘要】:目的探討國產(chǎn)多孔鉭材料對成骨細胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表達的影響。方法分離培養(yǎng)新生SD大鼠顱蓋骨成骨細胞并鑒定。根據(jù)國家標準制備多孔鉭浸提液,以多孔鉭浸提液與成骨細胞作為實驗組,以DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)成骨細胞作為對照組。MTT法檢測多孔鉭浸提液對成骨細胞生長及增殖的影響;倒置相差顯微鏡及掃描電鏡觀察成骨細胞在多孔鉭上粘附、生長及增殖的情況;實時熒光定量PCR技術(shù)檢測OPN、OC及FN mRNA的表達并進行定量分析。結(jié)果肉眼及掃描電鏡觀察多孔鉭外觀呈深灰色、多孔狀三維立體結(jié)構(gòu),表面及斷面均勻分布直徑400~600μm的微孔,內(nèi)部孔隙相互連通。MTT法檢測結(jié)果顯示,實驗組及對照組成骨細胞培養(yǎng)1~8 d,除第3天外,各時間點細胞光密度值差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。成骨細胞種植于多孔鉭培養(yǎng)結(jié)果顯示,材料表面和孔隙內(nèi)細胞疊層生長,分泌的骨基質(zhì)完全覆蓋材料表面。實時熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示,實驗組成骨基因OPN、OC、FN mRNA的相對表達量分別為1.45、1.79、1.69。結(jié)論國產(chǎn)多孔鉭材料具有良好三維立體空間構(gòu)型及良好的生物相容性,可刺激成骨細胞的粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA的表達。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of porous tantalum on osteoblast adhesion, proliferation and expression of osteogenic gene OPNOC and FN mRNA.Methods the osteoblasts of calvaria of newborn SD rats were isolated and identified.The porous tantalum extract was prepared according to the national standard. The effect of porous tantalum extract on the growth and proliferation of osteoblasts was detected by DMEM culture medium as the control group and osteoblast as experimental group.The adhesion, growth and proliferation of osteoblasts on porous tantalum were observed by inverted phase contrast microscope and scanning electron microscope, and the expression of OPNOC and FN mRNA were detected and quantitatively analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR.Results the appearance of porous tantalum was dark gray and porous three-dimensional structure was observed by naked eye and scanning electron microscope. The micropores with a diameter of 400 ~ 600 渭 m were evenly distributed on the surface and section. The inner pores were connected with each other by MTT method.In the experimental group and the control group, there was no significant difference in the optical density of osteoblasts between the experimental group and the control group at each time point except the 3rd day (P 0.05).The osteoblasts planted in porous tantalum showed that the surface of the material and the cells in the pores were stacked and the secreted bone matrix completely covered the surface of the material.The results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that the relative expression of osteogenic gene OCFN mRNA in the experimental group was 1.45 ~ 1.79 ~ 1.69, respectively.Conclusion porous tantalum has a good three-dimensional spatial configuration and good biocompatibility. It can stimulate osteoblast adhesion, proliferation and the expression of osteogenic gene OPNOC and FN mRNA.
【作者單位】: 河北聯(lián)合大學實驗中心;河北聯(lián)合大學附屬醫(yī)院骨科;河北聯(lián)合大學基礎(chǔ)醫(yī)學院解剖系;唐山市第二醫(yī)院關(guān)節(jié)科;
【基金】:國家科技部科技支撐課題(2012BAE06B03)~~
【分類號】:R318.08
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:1708016
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