流體剪切應(yīng)力對晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞生物學(xué)功能的影響
本文關(guān)鍵詞: 剪切應(yīng)力 內(nèi)皮祖細(xì)胞 細(xì)胞黏附 再內(nèi)皮化 出處:《醫(yī)用生物力學(xué)》2014年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的研究流體剪切應(yīng)力處理對晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)體外及體內(nèi)生物學(xué)功能的影響。方法密度梯度離心法分離大鼠骨髓單核細(xì)胞,應(yīng)用EGM-2MV進行體外培養(yǎng)。以3~4代的EPCs,即晚期EPCs為靶細(xì)胞,對其施以1.2 Pa剪切應(yīng)力處理。采用EdU標(biāo)記技術(shù)、黏附能力測定實驗、改良的Boyden小室、Annexin V/PI、β-半乳糖苷酶檢測法、Matrigel法、熒光定量RT-PCR等方法分別檢測剪切應(yīng)力對晚期EPCs增殖、黏附、遷移、凋亡、衰老、體外成血管及VEGF mRNA表達等生物學(xué)功能的影響。應(yīng)用大鼠頸動脈損傷模型及細(xì)胞原位移植等實驗手段檢測剪切應(yīng)力預(yù)處理對晚期EPCs修復(fù)受損內(nèi)皮的影響。結(jié)果 1.2 Pa剪切應(yīng)力處理可不同程度提高晚期EPCs的增殖、黏附、遷移及成血管能力(P0.01),上調(diào)VEGF的基因表達,抑制晚期EPCs的衰老及凋亡(P0.01);移植經(jīng)剪切應(yīng)力預(yù)處理的晚期EPCs可加速損傷內(nèi)皮的修復(fù),減緩內(nèi)膜的增生。結(jié)論流體剪切應(yīng)力可改善晚期EPCs的功能活性,提高晚期EPCs修復(fù)損傷血管內(nèi)皮的能力,這為EPCs的臨床應(yīng)用及剪切應(yīng)力介導(dǎo)的細(xì)胞療法提供了實驗依據(jù)。
[Abstract]:Objective to study the effects of fluid shear stress on the biological function of late endothelial progenitor cells (EPCs) in vitro and in vivo. Methods the bone marrow monocytes of rats were isolated by density gradient centrifugation. EGM-2MV was used for culture in vitro. The cells of 3 or 4 passages of EPCs were treated with 1.2 Pa shear stress. The modified Boyden chamber Annexin V / Pi, 尾 -galactosidase assay and Matrigel method were used. Fluorescence quantitative RT-PCR was used to detect the effects of shear stress on the proliferation, adhesion, migration, apoptosis and senescence of advanced EPCs. Effects of vascular formation in vitro and expression of VEGF mRNA on vascular formation and expression of VEGF mRNA in vitro. The effects of shear stress preconditioning on the repair of damaged endothelium in late EPCs were investigated by using rat carotid artery injury model and orthotopic transplantation of cells. Pa shear stress treatment could increase the proliferation of EPCs in different degree. The adhesion, migration and vascularization ability of P0.01a can up-regulate the expression of VEGF gene, inhibit the senescence and apoptosis of late EPCs, and accelerate the repair of damaged endothelium after transplantation of late EPCs pretreated by shear stress. Conclusion fluid shear stress can improve the functional activity of advanced EPCs and improve the ability of late EPCs to repair injured vascular endothelium, which provides experimental basis for clinical application of EPCs and shear stress mediated cell therapy.
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(30900290,31270993) 國家教育部“新世紀(jì)優(yōu)秀人才計劃”資助項目(NCET-10-0922) 山東省自然科學(xué)基金資助項目(ZR2011CQ030) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計劃(2011QZ024)
【分類號】:R318.01
【參考文獻】
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本文編號:1528094
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