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兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在藻酸鍶凝膠中體外三維培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-02-16 10:13

  本文關(guān)鍵詞: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 藻酸鍶 組織工程 出處:《中國(guó)矯形外科雜志》2014年07期  論文類型:期刊論文


【摘要】:[目的]觀察兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)于藻酸鍶凝膠中體外三維培養(yǎng)的形態(tài)與活性變化,為藻酸鍶凝膠復(fù)合干細(xì)胞應(yīng)用于骨組織工程提供理論依據(jù)。[方法]分離培養(yǎng)原代兔BMSCs并擴(kuò)增,取第3代BMSCs以細(xì)胞密度為5×105個(gè)/ml復(fù)合于藻酸鍶凝膠中三維培養(yǎng),每日于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)其進(jìn)行Live/Dead染色測(cè)細(xì)胞存活,CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖,并用掃描電鏡觀察凝膠的超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞于凝膠上的黏附情況。[結(jié)果]藻酸鍶凝膠質(zhì)軟、透明、滲透性較好;BMSCs接種于藻酸鍶凝膠中初始形態(tài)為圓形、呈懸浮生長(zhǎng),后細(xì)胞逐漸貼壁生長(zhǎng)并呈星形或多角形;接種第1 d和第14 d凝膠中活細(xì)胞率分別為(88.61±4.08)%和(92.16±2.10)%,兩者間無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);第4、7、10、13 d時(shí)二維培養(yǎng)組中OD值顯著高于三維培養(yǎng)組(P0.05);掃描電鏡示藻酸鍶凝膠呈典型的"雞蛋箱"樣結(jié)構(gòu),孔隙直徑大小平均為150μm;接種于凝膠中7 d后可見細(xì)胞均勻黏附于凝膠壁生長(zhǎng)。[結(jié)論]藻酸鍶凝膠是一種優(yōu)良的細(xì)胞支架,將其復(fù)合種子細(xì)胞應(yīng)用于骨組織工程具有廣闊的前景。
[Abstract]:[Objective] to observe the rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) changes in morphology and activity in vitro in three-dimensional alginate gel for strontium, strontium alginate gel composite application of stem cells in bone tissue engineering provides a theoretical basis. Methods the cultured rabbit BMSCs and amplified, and the third generation of BMSCs in cell density 5 x 105 /ml in alginate gel composite strontium cultured daily by inverted phase contrast microscope at different time points, the Live/Dead staining to measure the cell survival, cell proliferation was detected by CCK-8, adhesion. Results SEM was used to observe the ultrastructure and cell gel in the gel. Strontium alginate gel soft, transparent, good permeability; BMSCs were inoculated in alginate gel in the initial form of strontium is round, was suspended growth, after the cells were adherent and star shaped or polygon; first D and fourteenth d with gel live fine The cell rate was (88.61 + 4.08)% and (92.16 + 2.10)%, there was no statistically significant difference between the two groups (P0.05); the 4,7,10,13 D group was significantly higher than that in the two-dimensional culture od three-dimensional culture group (P0.05); scanning electron microscope showed that strontium alginate gel showed a typical "egg box" structure, pore the average diameter of 150 m to 7 d after inoculation; cell adhesion in visible uniform gel gel wall growth. Conclusion] strontium alginate gel is a kind of excellent scaffold, the composite of seed cells in bone tissue engineering has broad prospects.

【作者單位】: 南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨一科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81060147)
【分類號(hào)】:R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1515273

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