本文關(guān)鍵詞： 竹紅菌乙素脂質(zhì)體 鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞 脈絡(luò)膜新生血管 光動(dòng)力療法 藥代動(dòng)力學(xué) 光毒性　出處：《中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2012年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：正文：目的：探討竹紅菌乙素脂質(zhì)體（liposomal Hypocrellin B）對(duì)鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞（pulmonary microvascular endothelial cells，PMVECS）、棕色挪威（Brown Norway，BN）大鼠脈絡(luò)膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）動(dòng)物模型的光動(dòng)力效應(yīng)、在正常小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過(guò)程以及對(duì)小鼠皮膚的光毒性，為HB脂質(zhì)體應(yīng)用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：1. HB脂質(zhì)體對(duì)鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的光毒性和暗毒性研究。光毒組采用不同濃度HB脂質(zhì)體與鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞孵育4h后，予以波長(zhǎng)578.2nm黃光照射，功率密度20mW/cm2，能量密度20J/cm2，照射后繼續(xù)孵育24h，用MTT法測(cè)定細(xì)胞存活率。暗毒組，用不同濃度HB脂質(zhì)體在避光條件下與鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞孵育24h，用MTT法測(cè)定細(xì)胞存活率，計(jì)算HB脂質(zhì)體的光毒半數(shù)殺傷濃度及暗毒半數(shù)殺傷濃度，并與HB進(jìn)行比較。 2. CNV模型建立。24只BN大鼠隨機(jī)分為氪激光光凝后3d、7d、14d、21d、28d和56d組，共6組，用波長(zhǎng)647nm、功率260mW、光斑直徑50μm、曝光時(shí)間200ms的氪激光圍繞視乳頭避開(kāi)大血管進(jìn)行光凝，每只眼8點(diǎn)。通過(guò)眼底熒光素鈉造影（fundus fluorescein angiography, FFA）圖像和病理組織學(xué)改變。觀察激光光凝后3d-56d激光誘導(dǎo)CNV的演變過(guò)程。將成膜良好的動(dòng)物納入下一步實(shí)驗(yàn)。 3.將氪激光光凝后21d的CNV模型鼠20只隨機(jī)分為空白對(duì)照組（N，4只）和光動(dòng)力治療組（16只，，根據(jù)給藥劑量及PDT治療之后觀察時(shí)間分為A、B、C、D四個(gè)亞組）。所有治療組均經(jīng)大鼠股靜脈注射HB脂質(zhì)體，A、B兩組采用1mg/kgC、D兩組采用2mg/kg，所有治療組均在靜脈注射藥物后20min，以功率密度400mW/cm2，能量密度36J/cm2，波長(zhǎng)578.2nm黃光照射眼底，眼底光斑直徑皆為1000μm。治療后24h和7d行FFA檢查和組織病理學(xué)檢查判斷療效�？瞻讓�(duì)照組不予任何處理。 4. HB脂質(zhì)體的初步藥代動(dòng)力學(xué)研究。將72只正常小鼠隨機(jī)分成12個(gè)試驗(yàn)組，每組6只，每組對(duì)應(yīng)一個(gè)時(shí)間點(diǎn)（靜脈注射前及注射后即刻、5、10、20、30、60、90、120、180、240、360min），按2mg/kg劑量一次性尾靜脈注射藥物后，用熒光法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度，用DAS2.1.1（drug and statistics for windows）程序軟件擬合，血藥濃度-時(shí)間曲線進(jìn)行自動(dòng)房室模型的判別及藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的計(jì)算。 5. HB脂質(zhì)體對(duì)小鼠皮膚的光毒性研究。將200只昆明小鼠隨機(jī)分為4組，分別為生理鹽水對(duì)照組，HB脂質(zhì)體1mg/kg組，HB脂質(zhì)體2mg/kg組，HB脂質(zhì)體4mg/kg組。均采用尾靜脈注射一次性給藥。小鼠于給藥后的不同時(shí)間接受相同強(qiáng)度的模擬太陽(yáng)光照射60min。用6mm打孔器取左、右耳廓各l耳片稱重。通過(guò)小鼠耳片重量變化及背部去毛區(qū)、耳朵、病理組織學(xué)檢查評(píng)價(jià)皮膚光毒性。 結(jié)果： 1. HB脂質(zhì)體在照光及非照光條件下，對(duì)鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的殺傷濃度分別為53.45ng/mL和17.58μg/mL。光毒半數(shù)殺傷濃度與HB無(wú)明顯差異，暗毒半數(shù)殺傷濃度為HB的87倍。 2. FFA顯示光凝后3d CNV開(kāi)始形成。組織病理顯示21d以后CNV的纖維血管狀態(tài)維持相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)。 3.各實(shí)驗(yàn)組PDT后24h、7d未閉合CNV百分比與對(duì)照組相比大大降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.01）。2mg/Kg組CNV閉合率高于1mg/Kg組，2mg/Kg組對(duì)正常視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜的損傷為5級(jí)，1mg/Kg組對(duì)正常視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜的損傷為2級(jí)。HB脂質(zhì)體所需光照劑量、光敏劑用量及對(duì)正常視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜損傷三方面均低于HMME及Verteporfin。 4.正常小鼠按2mg/kg一次性尾靜脈注射給藥后，血清的藥-時(shí)曲線為三室模型一級(jí)吸收，其主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為： t1/2z=(2.319±0.462)h，Tmax=(0.127±0.048)h， Cmax=(51.105±2.869) mg/L。 5. HB脂質(zhì)體皮膚光毒實(shí)驗(yàn)各光敏劑劑量組的耳片重量與對(duì)照組耳片重量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。給藥后1天，HB脂質(zhì)體4mg/kg光照組有2例動(dòng)物耳緣皮膚組織真皮內(nèi)小血管充血，有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，余均未見(jiàn)異常。 結(jié)論： 1.HB脂質(zhì)體對(duì)鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的光動(dòng)力殺傷效果明顯。安全性比HB高。 2.HB脂質(zhì)體-PDT治療CNV療效確切，優(yōu)勢(shì)凸顯。在光照劑量一定的情況下，CNV閉合率呈光敏劑劑量依賴型，對(duì)正常視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜的損傷亦呈光敏劑劑量依賴型。還需進(jìn)一步研究合適的光照劑量及光敏劑劑量，在最大限度提高CNV閉合率的同時(shí)，最低限度降低對(duì)正常視網(wǎng)膜及脈絡(luò)膜的損傷，以達(dá)到光照劑量及光敏劑劑量的最大優(yōu)化。 3.HB脂質(zhì)體在正常小鼠體內(nèi)分布快、消除快，主要分布在血漿等細(xì)胞外液中，符合理想光敏劑的特點(diǎn)。 4. HB脂質(zhì)體對(duì)小鼠皮膚光毒性低、安全性高。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R758.51;R454.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 李超;陳耐生;魏金鋒;薛金萍;沈?qū)?黃金陵;孫嵐;王愛(ài)平;;靜脈注射福大賽因?qū)ッ餍∈蟮钠つw光毒性[J];癌變.畸變.突變;2009年05期

2 張曉光,龐利民,王桂云;脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤的氬激光治療[J];白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1998年01期

3 張歆;任百超;;年齡相關(guān)性黃斑變性的治療研究新進(jìn)展[J];國(guó)際眼科雜志;2007年06期

4 馬金石;卟啉類第二代光敏劑的發(fā)展[J];感光科學(xué)與光化學(xué);2002年02期

5 俞開(kāi)潮,程紅,金玲;光動(dòng)力治療用酞菁類光敏劑的合成研究進(jìn)展[J];感光科學(xué)與光化學(xué);2003年02期

本文編號(hào)：1479414