本文關鍵詞：骨髓間充質干細胞與脂肪干細胞構建人工復合皮的實驗研究

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【摘要】：目的:利用骨髓間充質干細胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)及脂肪干細胞(Adipose-derived Stem Cells,ADSCs)分別及聯合在體外與小腸黏膜下層構建人工復合皮,對比觀察其修復全層皮膚缺損創(chuàng)面的效果,以期尋找一種較好的人工復合皮。方法:1.取清潔健康日本大耳兔脛骨骨髓及頸部脂肪組織,分別于體外培養(yǎng)BMSCs及ADSCs,并擴增至第三代。取第三代的ADSCs進行成骨、成脂肪細胞分化實驗。分別用綠色熒光蛋白及細胞示蹤劑CM-Di L標記BMSCs及ADSCs。通過脫細胞法制備小腸黏膜下層(Small Intestinal Submucosa,SIS),并將標記完成的BMSCs及ADSCs種植于SIS上制成人工復合皮。2.取18只健康日本大耳兔,每只大耳兔于背部脊柱兩側共設計5個全層皮膚缺損創(chuàng)面,隨機分為五組:A組(ADSCs+SIS)、B組(BMSCs+SIS)、C組(ADSCs+BMSCs+SIS)、D組(SIS)及E組(空白組),每組分別于術后14天、21天、28天對創(chuàng)面大小進行測量,取材,進行HE染色觀察其組織結構。結果:1、培養(yǎng)至第三代的BMSCs呈梭形、多角形,成漩渦狀排列,增殖速度快;第三代ADSCs呈梭形、三角形,增殖能力旺盛。成脂及成骨誘導分化實驗表明所分離細胞為ADSCs。BMSCs經綠色熒光蛋白標記發(fā)出綠色熒光,熒光強;ADSCs經CM-Di L標記發(fā)出紅色熒光,熒光強。BMSCs及ADSCs均可生長于SIS上,增殖能力旺盛,二者共培養(yǎng)于SIS上,可制成人工復合皮。2、動物實驗:(1)大體觀察:術后14天A、B、C、D、E五組可見創(chuàng)面中央覆蓋較薄的痂皮,顏色較深;術后21天A、B、C三組創(chuàng)面基本愈合,上覆多量皮屑,創(chuàng)面縮小,創(chuàng)面顏色變淡,D、E兩組創(chuàng)面未完全愈合,上覆皮屑少,創(chuàng)面顏色仍較深;術后28天,A、B、C三組創(chuàng)面皮屑較多,創(chuàng)面明顯縮小,創(chuàng)面顏色與周圍正常組織相似,D、E兩組創(chuàng)面已愈合,創(chuàng)面明顯縮小,創(chuàng)面顏色變淡。術后實驗組A、B、C三組移植皮片表面較光滑,愈合效果優(yōu)于D、E兩組。術后14、21、28天實驗組A、B、C三組創(chuàng)面收縮率低于D、E兩組(P0.05),但A、B、C三組組內未見明顯差異;術后A、B、C三組創(chuàng)面完全愈合時間較D、E兩組低(P0.05),但A、B、C三組組內未見明顯差異。(2)HE染色:術后14天A、B、C三組可見部分成纖維細胞及少量炎性細胞,可見新生毛細血管長入,D、E兩組成纖維細胞及炎性細胞少,未見明顯新生毛細血管;術后21、28天,A、B、C三組真皮內膠原纖維致密,排列整齊,新生毛細血管分布較均勻,D、E兩組真皮膠原纖維排列稍紊亂,可見少量毛細血管分布。結論:利用BMSCs及ADSCs構建人工復合皮修復兔全層皮膚缺損創(chuàng)面時,能促進新生血管形成及創(chuàng)面上皮化,加速創(chuàng)面愈合,二者聯合培養(yǎng)創(chuàng)面與單獨培養(yǎng)構建人工復合皮組在創(chuàng)面愈合質量及減輕創(chuàng)面收縮率方面未見明顯差異。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R318.1

【參考文獻】

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1 何偉;李云霞;胡葵葵;;含附件的組織工程皮膚構建的研究進展[J];廣東醫(yī)學;2014年15期

2 袁耀東;魯峰;高建華;;細胞外基質在調控血管生成中的研究進展[J];中華實驗外科雜志;2014年06期

3 李仙松;杜娟;宋振嵐;李偉平;;大鼠骨髓間充質干細胞重建表皮細胞及皮膚附件[J];中國組織工程研究;2014年06期

4 羅旭;辛國華;曾逃方;林才;曾元臨;李郁蔥;邱澤亮;;微孔化豬脫細胞真皮基質與大鼠骨髓間充質細胞對裸鼠皮膚附件細胞再生的作用[J];中華燒傷雜志;2013年06期

5 韋葛堇;黃育強;覃萬安;廖長川;林舟丹;;髓核細胞共培養(yǎng)誘導骨髓間充質干細胞向類髓核細胞分化[J];中國組織工程研究;2013年45期

6 王鸞;王效杰;;小腸黏膜下層用作誘導組織再生及應用[J];沈陽醫(yī)學院學報;2013年02期

7 俞曉帆;熊猛;;脂肪干細胞對創(chuàng)面愈合作用的研究進展[J];組織工程與重建外科雜志;2013年02期

8 張親國;趙敏;謝芳;;成纖維細胞生長因子對各種創(chuàng)面愈合的促進作用[J];內蒙古醫(yī)學雜志;2013年03期

9 蒲曉姝;果磊;張敏珠;陳文海;王燦;汪燕;;大鼠骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)鑒定以及向神經干細胞分化的實驗研究[J];重慶醫(yī)科大學學報;2013年03期

10 沈國良;蘇本玄;林偉;祁強;趙小瑜;陸興安;;β射線照射皮膚損傷創(chuàng)面注射骨髓間充質干細胞后的創(chuàng)面愈合[J];中國組織工程研究;2013年06期

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本文編號：1199648