本文關鍵詞：新型復合骨材料阿倫磷酸鈉—羥基磷灰石—殼聚糖對BMSCs增殖的影響

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【摘要】：目的：利用一種我們研制的新型復合骨材料阿倫膦酸鈉-羥基磷灰石-殼聚糖(Alendronate-chitosan-hydroxyapatite、ALN/HA/CS),檢測它對骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells、BMSCs)增殖的影響。方法：利用新型復合骨材料,研究它對BMSCs增殖的影響。我們設計對照組為羥基磷灰石-殼聚糖復合材料,實驗組為阿倫膦酸鈉-羥基磷灰石-殼聚糖復合材料,并通過如下實驗檢測新型材料的功效：培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細胞原代細胞并進行傳代培養(yǎng)；在傳至第三代時將骨髓間充質(zhì)干細胞與復合支架共培養(yǎng),掃描電鏡觀察細胞與支架粘附生長情況,同時利用MTT法檢測復合支架對骨髓間充質(zhì)干細胞增殖影響；利用新型復合支架材料與骨髓間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng),觀察新型材料對BMSCs成骨誘導的效果。在成骨誘導第14天后將支架細胞進行貼壁伸展,并進行堿性磷酸酶染色；在成骨誘導的第3、7、14天,分別吸取上清液進行堿性磷酸酶活性分析；在成骨誘導第21天,將支架細胞洗脫爬片,待貼壁伸展后進行茜素紅染色；在成骨誘導第7、14、21天吸取上清液,ELASA檢測BGP蛋白表達,在成骨誘導第3、7、14天吸取上清液,ELASA檢測Ⅰ型膠原蛋白表達。結(jié)果：1、兔骨髓間充質(zhì)干細胞與復合支架共培養(yǎng),掃描電鏡觀察可觀察到細胞呈不規(guī)則形狀,細胞伸展并與材料表面黏附,新型復合材料阿倫膦酸鈉-羥基磷灰石-殼聚糖與傳統(tǒng)材料羥基磷灰石-殼聚糖無明顯區(qū)別。MTT檢測顯示,新型材料組骨髓間充質(zhì)干細胞增殖優(yōu)于傳統(tǒng)材料組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。成骨誘導14天后,新型材料組的ALP染色陽性表達明顯高于傳統(tǒng)材料組。成骨誘導3、7、14天,新型材料組ALP活性水平均明顯高于傳統(tǒng)材料組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。成骨誘導21天,新型材料組茜素紅陽性表達優(yōu)于傳統(tǒng)材料組。成骨誘導7天后,新型材料組BGP分泌與傳統(tǒng)材料組無明顯區(qū)別。成骨誘導14、21天,新型材料組BGP分泌量明顯高于傳統(tǒng)材料組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。成骨誘導3、7、14天,新型材料組工型膠原蛋白分泌量明顯高于傳統(tǒng)材料組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論：1、相比于羥基磷灰石-殼聚糖,新型復合材料阿倫膦酸鈉-羥基磷灰石-殼聚糖可有效促進骨髓間充質(zhì)干細胞增殖與成骨分化。2、新型復合材料阿倫膦酸鈉-羥基磷灰石-殼聚糖復合材料可以成為比傳統(tǒng)材料羥基磷灰石-殼聚糖更具優(yōu)勢的骨修復理想組織工程材料。
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R318.08

【參考文獻】

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本文編號：1198392