本文關(guān)鍵詞：K652重組表達IL-6基因?qū)K細胞表型和功能的影響

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【摘要】：目的:為了研究表達IL-6的重組K562細胞對自然殺傷細胞(NK)細胞的擴增數(shù)量、表型和功能的影響。方法:根據(jù)人類IL-6 c DNA的5'端序列,設(shè)計PCR引物以K562細胞c DNA文庫的DNA為模板進行擴增,表達,轉(zhuǎn)染,在K562細胞上表達IL-6基因,構(gòu)建重組的K562工程細胞作為刺激細胞,以人外周血單個核細胞(PBMC)為擴增培養(yǎng)對象,使NK細胞在體外培養(yǎng)條件下得到大量的擴增。流式細胞儀分析NK細胞表型。將NK細胞作用到K562細胞,對其殺傷性進行功能分析,51Cr釋放實驗檢測NK細胞對K562細胞殺傷水平的影響。結(jié)果:成功構(gòu)建了表達IL-6的重組K562細胞,和PBMC共同孵育后,培養(yǎng)體系經(jīng)過21 d的刺激后,IL-6重組K562細胞誘導(dǎo)PBMC擴增,CD56+CD16+CD3-細胞數(shù)量比誘導(dǎo)前擴增了(760±18)倍,CD56+CD16+CD3-細胞的純度從培養(yǎng)前占PBMC的6%±0.4%,擴增后第3組結(jié)果比未擴增的多了91%±2%。細胞毒實驗表明,在NK效應(yīng)細胞∶K562靶細胞為5∶1時,擴增的NK細胞的殺傷率達到了92%±2%。結(jié)論:本方法以重組K562為刺激細胞,能夠?qū)崿F(xiàn)NK細胞體外的大規(guī)模制備,建立了優(yōu)化的NK細胞體外擴增方法,且擴增的細胞殺傷K562細胞的活性較好。對于NK的大量擴增和應(yīng)用于臨床具有重要的指導(dǎo)意義。
【作者單位】： 河北省胸科醫(yī)院 河北省肺癌防治中心;河北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 重組K IL- 自然殺傷細胞 擴增 Cr釋放實驗
【基金】：2013年河北省省級重大醫(yī)學(xué)研究課題(No.ZD2013063) 國家自然科學(xué)基金(No.31101638)
【分類號】：R392
【正文快照】： 現(xiàn)在腫瘤對人類生存健康的威脅越來越嚴重,對腫瘤的治療方法也發(fā)生著越來越多的變化,各種各樣的腫瘤治療已經(jīng)顯現(xiàn)出來,成為治療腫瘤的重要發(fā)展方向。繼腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)、淋巴因子激活殺傷細胞(LAK)及CD3單抗激活的殺傷細胞(CD3AK)后,自然殺傷細胞(Nature killer,NK)的殺，

本文編號：993838