本文關(guān)鍵詞：定向誘導(dǎo)分化環(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨及成脂細(xì)胞的分化

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【摘要】：背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞屬于骨髓中的非造血干細(xì)胞,能夠在不同的條件下誘導(dǎo)分化為軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞等,是最有前途的組織工程種子細(xì)胞。目的:探討定向誘導(dǎo)分化環(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞分化的關(guān)系。方法:無菌抽取日本大耳兔骨髓,采用密度梯度離心法和細(xì)胞貼壁法分離、純化出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,分別采用成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基和成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng),培養(yǎng)后不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行蘇丹Ⅳ染色、Von Kossa染色、堿性磷酸酶活性檢測,比較細(xì)胞成脂和成骨率。以正常DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞為對照組。結(jié)果與結(jié)論:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)過7 d成脂誘導(dǎo)后細(xì)胞漿開始出現(xiàn)小脂滴、細(xì)胞無序,培養(yǎng)21 d后細(xì)胞漿內(nèi)形成高折光性的脂滴。蘇丹Ⅳ染色結(jié)果顯示:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞克隆中心的細(xì)胞漿內(nèi)存在大量的顆粒狀紅色脂滴,對照組僅5%骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)過7 d成骨誘導(dǎo)后細(xì)胞逐漸匯合成鋪路石狀,并且形成多個(gè)結(jié)節(jié);培養(yǎng)14 d后能夠看見褐色點(diǎn)狀礦化結(jié)節(jié)中心;培養(yǎng)21 d后形成小片狀礦化結(jié)節(jié)。成骨誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)組成骨率為40%,成脂率為20%,顯著高于對照組(成骨率為5%,成脂率為5%)。結(jié)果提示在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能夠一部分轉(zhuǎn)化為脂肪細(xì)胞,另一部轉(zhuǎn)化為骨細(xì)胞,并且二者存在一定的聯(lián)系,即分化的脂肪細(xì)胞多,骨細(xì)胞則少;反之分化的脂肪細(xì)胞少,骨細(xì)胞則多。
【作者單位】： 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬紅會醫(yī)院脊柱外科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞分化 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 誘導(dǎo)分化 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨細(xì)胞 脂肪細(xì)胞
【基金】：陜西省科技廳科技惠民專項(xiàng)(2013k14-02-13)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction嚴(yán)格遵守相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行飼養(yǎng),合格證號為SCXK(粵)骨髓是機(jī)體最大的干細(xì)胞庫,包括了造血干細(xì)胞、間2007-0010。實(shí)驗(yàn)過程中對動(dòng)物的處置符合2009年《Ethical充質(zhì)干細(xì)胞等,它是一種具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞,issues in animal experimentation》相關(guān)動(dòng)物倫理

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本文編號：915382