本文關(guān)鍵詞：重組蛋白PTD-HSP27的制備及其穿細(xì)胞膜和角膜組織的功能研究

  更多相關(guān)文章： 蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)域 熱休克蛋白 反式轉(zhuǎn)錄激活因子 晶狀體上皮細(xì)胞

【摘要】：目的:制備PTD-HSP27蛋白并研究其能否穿過(guò)人晶狀體上皮細(xì)胞SRA01/04細(xì)胞膜及新西蘭大白兔的角膜組織進(jìn)入眼前房。方法:利用重疊延伸PCR法獲得重組目的基因片段PTD-HSPB1-6His,構(gòu)建重組質(zhì)粒p KYB-PTD-HSP27-6His,原核誘導(dǎo)PTD-HSP27蛋白表達(dá)及純化重組蛋白后對(duì)其進(jìn)行Western blotting鑒定;用異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記重組蛋白PTD-HSP27并檢測(cè)其穿透SRA01/04細(xì)胞膜的能力及兔眼角膜組織的能力。結(jié)果:成功構(gòu)建并純化制備目的蛋白PTD-HSP27,在PTD-HSP27孵育后的SRA01/04細(xì)胞及結(jié)膜囊滴注PTDHSP27兔眼前房?jī)?nèi)均可檢測(cè)出重組蛋白PTD-HSP27。結(jié)論:通過(guò)重疊延伸PCR法及鎳柱層析純化法可以獲得較純的重組蛋白PTD-HSP27;重組蛋白PTD-HSP27能夠穿透SRA01/04細(xì)胞膜及穿越兔眼角膜進(jìn)入房水。
【作者單位】： 暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科;暨南大學(xué)生物工程研究所;
【關(guān)鍵詞】： 蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)域 熱休克蛋白 反式轉(zhuǎn)錄激活因子 晶狀體上皮細(xì)胞
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)(No.2011CB707501) 廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.S2013010016037)
【分類(lèi)號(hào)】：R363
【正文快照】： 熱休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)的低分子量使其隸屬于小分子熱休克蛋白家族,是由生物體(或離體培養(yǎng)細(xì)胞)在不良環(huán)境因素刺激下產(chǎn)生的一組應(yīng)激蛋白,它在結(jié)構(gòu)上具有高度的保守性,對(duì)于細(xì)胞的結(jié)構(gòu)維持、更新和修復(fù)等方面起到十分重要的保護(hù)細(xì)胞作用。反式轉(zhuǎn)錄激活因子

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 閆冀煥;史玲莉;韓偉;崔鷹;趙俊偉;張舒林;;7種結(jié)核分枝桿菌重組蛋白的純化及血清學(xué)特性[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;2013年03期

2 肖潔;郭剛;鄒全明;;提高大腸桿菌分泌表達(dá)重組蛋白的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)雜志;2007年02期

3 陳章權(quán);梁曉東;陸田田;黃震;;重組人psoriasin蛋白的制備與鑒定[J];山東醫(yī)藥;2008年48期

4 王新華;胡敬東;孔娜;李宏梅;趙宏坤;;人工分子伴侶輔助雞白細(xì)胞介素18重組蛋白的復(fù)性[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2008年04期

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本文編號(hào)：902244