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體外誘導人羊膜上皮細胞分化為結(jié)膜上皮樣細胞的實驗研究

發(fā)布時間:2017-09-22 04:21

  本文關(guān)鍵詞:體外誘導人羊膜上皮細胞分化為結(jié)膜上皮樣細胞的實驗研究


  更多相關(guān)文章: 人羊膜上皮細胞 共培養(yǎng) 轉(zhuǎn)分化 兔結(jié)膜上皮細胞 組織工程結(jié)膜


【摘要】:目的:建立體外培養(yǎng)人羊膜上皮細胞(HAECs)和兔結(jié)膜上皮細胞的方法,通過將兩種細胞共培養(yǎng),觀察并檢測是否能將人羊膜上皮細胞誘導分化為結(jié)膜上皮樣細胞。 方法:①分別采用酶消化法和組織塊法獲得HAECs和兔結(jié)膜上皮細胞,并對培養(yǎng)的細胞進行形態(tài)學觀察;②將HAECs和兔結(jié)膜上皮細胞在Transwell非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)中共培養(yǎng)10天,,以誘導HAECs分化;③通過倒置顯微鏡和原子力顯微鏡對誘導前后的HAECs進行形態(tài)學及超微結(jié)構(gòu)比較,對誘導前后的HAECs進行PAS染色、HE染色,免疫熒光法檢測誘導前后HAECs中CK4、MUC4、MUC5AC的表達,實時定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)檢測分化細胞MUC4、MUC5AC mRNA的表達。 結(jié)果:共培養(yǎng)后的人羊膜上皮細胞和兔結(jié)膜上皮細胞形態(tài)較為相似,誘導后的HAECs中可見少量PAS陽性細胞,細胞免疫熒光法檢測到誘導后HAECs中CK4、MUC4、MUC5AC呈陽性表達,qRT-PCR檢測到分化后細胞MUC4、MUC5AC mRNA表達水平較誘導前上調(diào)。 結(jié)論:HAECs在與兔結(jié)膜上皮細胞共培養(yǎng)誘導條件下,可以向結(jié)膜上皮樣細胞和杯狀細胞轉(zhuǎn)分化。
【關(guān)鍵詞】:人羊膜上皮細胞 共培養(yǎng) 轉(zhuǎn)分化 兔結(jié)膜上皮細胞 組織工程結(jié)膜
【學位授予單位】:暨南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R329.2
【目錄】:
  • 中文摘要3-4
  • Abstract4-5
  • 目錄5-6
  • 前言6-9
  • 1.結(jié)膜的組織結(jié)構(gòu)和功能6
  • 2. 結(jié)膜重建的主要治療方法6
  • 3. 組織工程結(jié)膜的研究進展6-8
  • 4. 人羊膜上皮細胞的干細胞特性及其在結(jié)膜重建的應用前景8-9
  • 第一部分 人羊膜上皮細胞和兔結(jié)膜上皮細胞的體外培養(yǎng)及鑒定9-17
  • 材料與方法10-15
  • 結(jié)果15-16
  • 討論16-17
  • 第二部分 誘導人羊膜上皮細胞向結(jié)膜上皮樣細胞轉(zhuǎn)分化及鑒定17-27
  • 材料與方法18-24
  • 結(jié)果24-25
  • 討論25-27
  • 全文結(jié)論27-28
  • 參考文獻28-34
  • 附圖34-47
  • 在學期間發(fā)表論文47-48
  • 致謝48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號:898755

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