本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用TALEN技術(shù)敲除gata4基因建立斑馬魚(yú)先天性心臟病模型

  更多相關(guān)文章： TALEN gata基因 斑馬魚(yú) 模型 動(dòng)物 先天性心臟病

【摘要】：目的人工構(gòu)建TALEN靶向敲除載體敲除gata4基因,建立斑馬魚(yú)先天性心臟病動(dòng)物模型。方法采用單元組裝法構(gòu)建靶向敲除gata4基因的載體,將其體外轉(zhuǎn)錄成TALEN mRNAs,通過(guò)顯微注射的方式注入單細(xì)胞期受精卵中,胚胎檢測(cè)TALEN的敲除效率,再通過(guò)剪尾、酶切、測(cè)序篩選發(fā)生基因突變的斑馬魚(yú)及突變的類(lèi)型。結(jié)果酶切、測(cè)序結(jié)果證實(shí)成功構(gòu)建出正確的gata4靶向敲除載體,注入斑馬魚(yú)受精卵中,發(fā)生基因敲除的效率為35.18%,通過(guò)剪尾、PCR、酶切檢測(cè)成功地篩選出了發(fā)生基因突變的斑馬魚(yú),測(cè)序結(jié)果顯示出不同種類(lèi)的gata4基因突變。結(jié)論成功構(gòu)建gata4基因敲除的斑馬魚(yú)動(dòng)物模型,為進(jìn)一步研究人類(lèi)gata4基因突變引起先天性心臟病的發(fā)病機(jī)制提供了良好的動(dòng)物模型。
【作者單位】： 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院研究生院;國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委科學(xué)技術(shù)研究所;
【關(guān)鍵詞】： TALEN gata基因 斑馬魚(yú) 模型 動(dòng)物 先天性心臟病
【基金】：中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)專(zhuān)項(xiàng)資金項(xiàng)目-優(yōu)秀青年科技人才創(chuàng)業(yè)基金項(xiàng)目(編號(hào):2012GJSSJKC02) 國(guó)家十二五科技支撐計(jì)劃計(jì)劃生育技術(shù)安全性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物培育關(guān)鍵性共享技術(shù)研究項(xiàng)目(編號(hào):2012BA131B06)
【分類(lèi)號(hào)】：R541.1;R-332
【正文快照】： 。先天性心臟病(congenital heart disease,CHD)是由于胚胎發(fā)育過(guò)程中心臟、血管發(fā)育異常而導(dǎo)致心臟、血管在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能和代謝方面發(fā)生異常的一大類(lèi)疾病,是人類(lèi)極為普遍和具有破壞性的出生缺陷,發(fā)病率約占活產(chǎn)嬰兒的0.8%[1],嚴(yán)重危害胎兒、新生兒、嬰幼兒及兒童健康。目

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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2 孫淑娜;桂永浩;蔣t，

本文編號(hào)：857977