本文關(guān)鍵詞：大鼠局灶性腦缺血致脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷模型的建立及遠(yuǎn)志對其的保護(hù)作用

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【摘要】：缺血性腦損傷即缺血性腦血管疾�。╥schemic cerebro vascular disease,ICVD），指顱內(nèi)供應(yīng)腦部的動脈血管管壁發(fā)生病理改變，使血管管腔狹窄、閉塞、血流停滯，引起相應(yīng)供血部位的腦組織發(fā)生缺血性壞死，進(jìn)而出現(xiàn)相應(yīng)的神經(jīng)功能障礙。ICVD具有發(fā)病率高、致死率高、復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)。隨著醫(yī)學(xué)水平的提高，雖經(jīng)積極治療后存活率逐漸提高，但50%~70%的幸存者遺留不同程度的學(xué)習(xí)記憶障礙及運(yùn)動障礙，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，目前已成為威脅人類健康的主要疾病之一。腦組織缺血缺氧時(shí)會產(chǎn)生一系列的病理變化，近年來，對于ICVD發(fā)病機(jī)制的研究理論已日漸豐富，但腦組織缺血是否引起脊髓損傷（spinal cord injury, SCI）及其機(jī)制國內(nèi)外報(bào)道甚少，進(jìn)一步探討其發(fā)病機(jī)制對臨床預(yù)防和治療有十分重要的意義。 近年來，中藥多靶點(diǎn)治療越來越受到關(guān)注。已有研究表明，中藥遠(yuǎn)志（Polygala）對癡呆、糖尿病(diabetes mellitus, DM)等動物模型的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system, CNS）有保護(hù)作用，但關(guān)于遠(yuǎn)志對腦缺血時(shí)SCI作用的研究國內(nèi)外報(bào)道甚少。 本研究采用線栓法建立大鼠大腦中動脈栓塞（Middle Cerebral ArteryOcclusion, MCAO）模型，探討大鼠局灶性腦缺血對脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元的影響及遠(yuǎn)志對其的保護(hù)作用，為臨床預(yù)防和治療腦缺血致SCI提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。第一部分大鼠局灶性腦缺血致脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷模型的建立 目的： 本研究采用線栓法建立大鼠MCAO模型，通過觀察大鼠局灶性腦缺血后不同時(shí)間點(diǎn)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)變化和乙酰膽堿酯酶（acetylcholinesterase,AChE）含量的變化，逐步建立大鼠局灶性腦缺血致脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷的模型。 方法： 雄性SD大鼠20只，隨機(jī)分為4組，均采用線栓法建立MCAO模型，術(shù)后大鼠分別存活1W、2W、4W、8W，取脊髓頸膨大。 尼氏染色法觀察大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化；亞鐵氰化銅法（Karnovsky-Roots）顯示脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量的變化。 結(jié)果： 1各組大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu) 光鏡下各組大鼠對照側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，突起清晰可見，細(xì)胞核呈圓形居胞體正中，尼氏體呈虎斑狀。1W組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元接近對照側(cè)大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元。2W組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元胞體腫脹，細(xì)胞核移位。4W組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元著色深淺不一，胞體腫脹，細(xì)胞核移位，部分尼氏體溶解。8W組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元可見部分細(xì)胞核溶解、細(xì)胞脫失，，胞體數(shù)目減少。 2各組大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量 各組大鼠對照側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元呈現(xiàn)清晰的紅棕色顆粒，此為AChE活性處的陽性產(chǎn)物，神經(jīng)元胞體輪廓清晰，細(xì)胞核不著色。腦缺血1W組實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量高于對照側(cè)（P0.01）。腦缺血2W組實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量開始低于對照側(cè)（P0.01），腦缺血4W組、8W組此變化更為明顯（P0.01）。 結(jié)論： 1大鼠局灶性腦缺血可導(dǎo)致脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生病理變化。 2大鼠局灶性腦缺血可導(dǎo)致脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量發(fā)生變化。 3成功建立了大鼠局灶性腦缺血致脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷模型，且腦缺血時(shí)間至少為8周。第二部分遠(yuǎn)志對局灶性腦缺血致大鼠脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用 目的： 本研究采用大腦中動脈線栓法建立大鼠局灶性腦缺血致脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷模型。通過觀察大鼠局灶性腦缺血后脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化、AChE含量的變化，電鏡下觀察脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元胞體及突觸超微結(jié)構(gòu)的變化，探討遠(yuǎn)志對局灶性腦缺血大鼠脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元的保護(hù)作用。 方法： 雄性SD大鼠15只，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組、模型組和遠(yuǎn)志預(yù)防組，每組5只。模型組和遠(yuǎn)志預(yù)防組均采用線栓法建立MCAO模型，假手術(shù)組大鼠僅游離結(jié)扎頸外動脈，不將魚線從頸外動脈插入頸內(nèi)動脈阻塞大腦中動脈，其余同模型組和遠(yuǎn)志預(yù)防組。遠(yuǎn)志預(yù)防組大鼠在腦缺血模型建立后給予遠(yuǎn)志（生藥1.2g/kg/d）灌胃8周；假手術(shù)組及模型組大鼠均給與同體積的生理鹽水（3ml/kg/d）灌胃8周。 尼氏染色法觀察大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化；電鏡下觀察脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元胞體及突觸超微結(jié)構(gòu)的變化；Karnovsky-Roots顯示脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量的變化。 結(jié)果： 1各組大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu) 光鏡下各組大鼠對照側(cè)及假手術(shù)組實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，突起清晰可見，細(xì)胞核呈圓形居胞體正中，尼氏體呈斑塊狀。腦缺血模型組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元著色深淺不一，胞體腫脹，尼氏體溶解，部分細(xì)胞核溶解、消失，胞體數(shù)目減少。遠(yuǎn)志預(yù)防組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)及數(shù)目均好于模型組。 2各組大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元胞體及突觸超微結(jié)構(gòu) 電鏡下各組大鼠對照側(cè)及假手術(shù)組實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元胞體及突觸超微結(jié)構(gòu)正常；模型組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元胞體染色質(zhì)邊集，核膜模糊、溶解，線粒體腫脹變性、嵴斷裂，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、斷裂、脫顆粒，溶酶體增多。突觸可見電子致密型潰變及電子透明型潰變。遠(yuǎn)志預(yù)防組實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元胞體及突觸超微結(jié)構(gòu)均好于模型組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)。 3各組大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量 各組大鼠對照側(cè)及假手術(shù)組實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元呈現(xiàn)清晰的紅棕色顆粒，此為AChE活性處的陽性產(chǎn)物，神經(jīng)元胞體輪廓清晰，細(xì)胞核不著色。腦缺血模型組實(shí)驗(yàn)側(cè)脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE含量低于對照側(cè)（P0.01）。遠(yuǎn)志預(yù)防組AChE含量低于對照側(cè)，但明顯高于模型組實(shí)驗(yàn)側(cè)（P0.01）。 結(jié)論： 1遠(yuǎn)志可改善局灶性腦缺血大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)、神經(jīng)元胞體及突觸超微結(jié)構(gòu)的病理變化。 2遠(yuǎn)志可上調(diào)局灶性腦缺血大鼠脊髓前角外側(cè)核運(yùn)動神經(jīng)元AChE的表達(dá)。 3遠(yuǎn)志對局灶性腦缺血致大鼠脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷具有良好的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血 遠(yuǎn)志 乙酰膽堿酯酶 脊髓 突觸
【學(xué)位授予單位】：承德醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R-332;R743
【目錄】：

• 摘要5-9
• ABSTRACT9-14
• 英文縮寫14-15
• 引言15-16
• 第一部分大鼠局灶性腦缺血致脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷模型的建立16-35
• 前言16
• 材料與方法16-19
• 1 材料16-17
• 2 方法17-19
• 結(jié)果19-21
• 附圖21-28
• 附表28-29
• 討論29-32
• 小結(jié)32-33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 第二部分遠(yuǎn)志對局灶性腦缺血致大鼠脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用35-57
• 前言35
• 材料與方法35-38
• 1 材料35-37
• 2 方法37-38
• 結(jié)果38-40
• 附圖40-50
• 附表50-51
• 討論51-53
• 小結(jié)53-55
• 參考文獻(xiàn)55-57
• 結(jié)論57-58
• 綜述58-66
• 參考文獻(xiàn)64-66
• 致謝66-67
• 個(gè)人簡歷67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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5 吳伯智;謝s

本文編號：766838