本文關(guān)鍵詞：細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴蛋白質(zhì)組學(xué)研究及生物信息學(xué)分析

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【摘要】：目的在前期研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)雙向電泳條件的優(yōu)化，對(duì)細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)和生物信息學(xué)分析，進(jìn)一步研究原頭蚴蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)構(gòu)成和功能情況，尋找具有特異性的靶標(biāo)蛋白，為包蟲病的早期診斷、新藥開發(fā)、疫苗篩選，提供理論依據(jù)。 方法1.取寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院肝膽外科包蟲病人術(shù)后的包囊，經(jīng)無(wú)菌分離細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴。2.對(duì)原頭蚴蛋白質(zhì)樣品并進(jìn)行雙向電泳分離，并對(duì)雙向電泳條件進(jìn)行優(yōu)化。3.選擇分離的蛋白點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF/MS檢測(cè)得到肽指紋圖譜PMF。4.將PMF數(shù)據(jù)提交到互聯(lián)網(wǎng)中蛋白信息研究數(shù)據(jù)庫(kù)中，與已有的蛋白信息進(jìn)行匹配分析，初步鑒定出樣本中蛋白質(zhì)，通過(guò)COGs（Clustersof Orthologous Groups of proteins）蛋白質(zhì)直系同源簇?cái)?shù)據(jù)庫(kù)、 GO （GeneOntology）蛋白質(zhì)功能分類數(shù)據(jù)庫(kù)、 KEGG pathway蛋白質(zhì)代謝通路數(shù)據(jù)庫(kù)，分析這些蛋白的功能與性質(zhì)。5.利用免疫印跡的方法，用包蟲病人的血清識(shí)別原頭蚴抗原，，并進(jìn)行質(zhì)譜鑒定及生物信息學(xué)分析。 結(jié)果1.通過(guò)原頭蚴蛋白質(zhì)樣品的雙向電泳分析，獲得了330個(gè)蛋白點(diǎn)。2.從雙向電泳凝膠上切下來(lái)的蛋白點(diǎn)通過(guò)MALDI-TOF MS質(zhì)譜檢測(cè)，原頭蚴樣品中有157個(gè)蛋白點(diǎn)獲得了肽指紋圖譜（PMF）數(shù)據(jù)。3.初步鑒定了細(xì)粒棘球蚴原頭蚴中的部分蛋白點(diǎn)，共有49個(gè)蛋白點(diǎn)。4.對(duì)鑒定得到的蛋白點(diǎn)，我們進(jìn)行了生物信息學(xué)的初步分析，發(fā)現(xiàn)這些蛋白主要與細(xì)胞組成、新陳代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及物質(zhì)運(yùn)輸有關(guān)。5.對(duì)原頭蚴蛋白利用包蟲病人的血清對(duì)對(duì)原頭蚴蛋白進(jìn)行western blot的識(shí)別，成功識(shí)別了80個(gè)蛋白點(diǎn)，并對(duì)這些蛋白點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，最后有28個(gè)蛋白點(diǎn)得到鑒定。 結(jié)論通過(guò)雙向電泳條件的優(yōu)化，成功建立了細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜；利用蛋白質(zhì)組學(xué)和生物信息學(xué)技術(shù)，進(jìn)一步研究原頭蚴蛋白質(zhì)的構(gòu)成和功能情況，成功建立了細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴蛋白質(zhì)組基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)
【關(guān)鍵詞】：細(xì)粒棘球絳蟲 原頭蚴 蛋白組學(xué) 雙向電泳 MALDI-TOF-MS
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R383.33;R3411
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 前言10-14
• 第一部分 原頭蚴蛋白質(zhì)組學(xué)分析14-44
• 材料與方法14-23
• 結(jié)果23-36
• 討論36-44
• 第二部分 包蟲病人抗血清對(duì)原頭蚴抗原的篩選44-58
• 材料與方法44-47
• 結(jié)果47-55
• 討論55-58
• 結(jié)論58-59
• 參考文獻(xiàn)59-64
• 文獻(xiàn)綜述64-70
• 綜述參考文獻(xiàn)68-70
• 致謝70-71
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文71-72
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷72

【相似文獻(xiàn)】

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1 李偉;;細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴復(fù)合染色方法的探討[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2006年02期

2 王維;丁兆勛;;人工感染細(xì)粒棘球蚴在狐貍體的觀察[J];新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1993年03期

3 包根書;張虹;景濤;喬華;王靜;;阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體體外抗細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴作用[J];中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2008年06期

4 陳飲銘;寇星燦;葉于聰;許子俊;王志剛;熊素梅;張榮泉;;細(xì)粒棘球蚴病的實(shí)驗(yàn)研究——Ⅶ、細(xì)粒棘粒絳蟲原頭蚴的掃描電鏡觀察[J];青海醫(yī)藥雜志;1983年05期

5 湯九紅;高春麗;;采用超高倍顯微診斷儀觀察原頭蚴1例[J];河南科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年04期

6 袁麗英;張壯志;石保新;古努爾·吐爾遜;米曉云;王進(jìn)成;張文寶;阿依努爾;阿布里克木;阿不都;阿布利茲;張玲;岳城;;細(xì)粒棘球蚴-原頭蚴體外培養(yǎng)成囊模型的建立[J];畜牧與獸醫(yī);2009年07期

7 薛弘燮;傅玉才;韓茂莉;吳炳洪;鄭慧琴;;幾種化療藥物殺原頭蚴的效果比較[J];新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1986年04期

8 王校智;李永壽;馮勝利;;包蟲原頭蚴沉降速率測(cè)定及其臨床意義[J];青海醫(yī)藥雜志;1993年05期

9 薛弘燮;康金鳳;吳炳洪;;細(xì)粒棘球絳蟲(E.g)原頭蚴的簡(jiǎn)易培養(yǎng)[J];新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1992年03期

10 王虎，武海燕;青海高原不同源原頭蚴感染小鼠后繼發(fā)性棘球蚴的超微結(jié)構(gòu)觀察[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1994年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 袁麗英;張壯志;石保新;古努爾.吐爾遜;米曉云;王進(jìn)成;張文寶;阿依努爾;阿布里克木;阿不都;阿布利茲;張玲;;細(xì)粒棘球蚴——原頭蚴體外培養(yǎng)成囊模型的建立[A];第二屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

2 米曉云;石保新;張壯志;古努爾.吐爾遜;袁麗英;趙莉;王進(jìn)成;張文寶;張玲;阿依努爾;阿布里克木;阿不都;阿布利茲;;細(xì)粒棘球絳蟲幼蟲——原頭蚴感染比格犬(Beagle)試驗(yàn)[A];第二屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

3 米曉云;袁麗英;張壯志;石保新;阿布都;阿依努爾;張玲;阿布里克木;王進(jìn)成;岳城;張文寶;;細(xì)粒棘球絳蟲——原頭蚴在兩種細(xì)胞培養(yǎng)液中體外培養(yǎng)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)成立大會(huì)暨第一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

4 趙莉;張壯志;石保新;張旭;古努爾·吐爾遜;米曉云;吐爾洪·依米提;王進(jìn)成;馬正海;巫劍;張文寶;李國(guó)慶;;細(xì)粒棘球蚴原頭蚴-成蟲(PSC-AW)和原頭蚴-成囊(PSC-CW)抑制差減雜交文庫(kù)中差異表達(dá)基因的篩選及生物信息學(xué)分析[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第六次代表大會(huì)暨第十一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

5 石保新;張壯志;王進(jìn)成;李欣;雒燕;張文寶;;愛普銳克-食肉動(dòng)物自動(dòng)吞食片對(duì)犬細(xì)粒棘球絳蟲驅(qū)除試驗(yàn)[A];第二屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

6 袁麗英;米曉云;石保新;張壯志;古努爾·吐爾遜;張文寶;張玲;阿依努爾;阿布里克木;阿不都;阿布利茲;;細(xì)粒棘球絳蟲幼蟲——原頭蚴感染比格犬(Beagle)試驗(yàn)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)成立大會(huì)暨第一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

7 石保新;巫劍;米曉云;古努爾·吐爾遜;張壯志;張文寶;岳城;;犬腸系膜淋巴結(jié)免疫組化反應(yīng)的探索[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第六次代表大會(huì)暨第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

8 張文寶;李軍;由弘;張壯志;古努爾·吐爾遜;AlexLoukasa;DonaldP.McManusa;;表達(dá)細(xì)粒棘球絳蟲成蟲不同發(fā)育階段的基因家族[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

9 丁劍冰;魏曉麗;馬秀敏;林仁勇;王儼;張靜萍;溫浩;;Eg95基因疫苗對(duì)繼發(fā)性細(xì)粒棘球蚴感染小鼠的免疫保護(hù)作用研究[A];2005全國(guó)第二屆核酸疫苗研討會(huì)論文集[C];2005年

10 張文寶;李軍;由弘;張壯志;古努爾·吐爾遜;ALEXLOUKAS;ANDDONALDP.MCMANUS;;對(duì)中國(guó)新疆細(xì)粒棘球絳蟲不同發(fā)育階段Eg95重組抗原進(jìn)行表達(dá)[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉明;包蟲病[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2009年

2 家啟;反芻動(dòng)物棘球蚴病的防治[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2006年

3 記者 賈少?gòu)?qiáng)　通訊員 王靜思;華大基因參與重大研究項(xiàng)目[N];深圳商報(bào);2011年

4 陳繼培;狗也會(huì)傳播寄生蟲病[N];四川科技報(bào);2002年

5 新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所 王光雷;犬絳蟲病的防治[N];新疆科技報(bào)(漢);2003年

6 本報(bào)記者 陳璞;田鼠絕對(duì)不應(yīng)上餐桌[N];大眾科技報(bào);2007年

7 ;管好家犬有助防包蟲病[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

8 記者 張穎 伊潔;農(nóng)林大學(xué)學(xué)生喜獲“挑戰(zhàn)杯”特等獎(jiǎng)[N];福建日?qǐng)?bào);2005年

9 本報(bào)記者 伊潔 張穎;“挑戰(zhàn)杯”的勝利者[N];福建日?qǐng)?bào);2005年

10 何燕;維生素C研發(fā)：成就中國(guó)工業(yè)微生物專利[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 侯秋蓮;應(yīng)用SSH技術(shù)研究氧化脅迫下細(xì)粒棘球蚴基因的表達(dá)[D];新疆大學(xué);2008年

2 王俊安;高強(qiáng)度聚焦超聲（HIFU）殺傷細(xì)粒棘球蚴的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

3 周必英;細(xì)粒棘球絳蟲重組Bb-Eg95-EgA31疫苗構(gòu)建及其免疫機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

4 惠文巧;MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細(xì)粒棘球絳蟲蟲卵后小腸、肝臟差異表達(dá)基因的篩選[D];石河子大學(xué);2013年

5 鄒曉毅;高強(qiáng)度聚焦超聲波殺傷細(xì)粒棘球絳蟲棘球蚴的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

6 馬秀敏;新疆細(xì)粒棘球絳蟲基因多態(tài)性及實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2007年

7 吳洽慶;人TCP11a、ZNF313基因在大腸桿菌中的蛋白表達(dá)及其在小鼠和人睪丸中的免疫組織化學(xué)分析[D];四川大學(xué);2004年

8 趙佳媛;靈長(zhǎng)類二氧化碳感知通路相關(guān)基因的進(jìn)化及生物信息學(xué)分析[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

9 張啟軍;利用SSR和四個(gè)測(cè)序水稻品種構(gòu)建分子圖譜及QTLs分析[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

10 徐民俊;條斑紫菜孢子體功能基因組特征及鐵氧化還原蛋白亞基Ⅰ基因分析[D];中國(guó)海洋大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李君良;細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴蛋白質(zhì)組學(xué)研究及生物信息學(xué)分析[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2013年

2 杜娟;細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴、囊壁蛋白質(zhì)組學(xué)的初步研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2011年

3 高鵬;細(xì)粒棘球蚴原頭蚴雙向電泳圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)的建立及標(biāo)記蛋白的定位[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2011年

4 陳小林;原頭蚴/囊液體外對(duì)小鼠脾細(xì)胞免疫逃避中的作用[D];石河子大學(xué);2013年

5 朱明星;細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴mRNA測(cè)序及生物信息學(xué)分析[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2013年

6 巨艷;細(xì)粒棘球絳蟲原頭蚴mRNA測(cè)序及表達(dá)譜分析[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2013年

7 袁麗英;培養(yǎng)液成分變化對(duì)原頭蚴體外培養(yǎng)的影響[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 朱維;新疆棘球蚴Eg95抗原基因克隆、原核表達(dá)[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

9 王慧;細(xì)粒棘球絳蟲硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶基因的克隆、表達(dá)及鑒定[D];新疆大學(xué);2008年

10 巫劍;細(xì)粒棘球絳蟲感染犬及EgM9蛋白免疫犬引起的免疫應(yīng)答研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

本文編號(hào)：756650