血清型A肉毒桿菌神經(jīng)毒素重鏈對Neuro-2a細胞的促神經(jīng)突起再生作用
本文關鍵詞:血清型A肉毒桿菌神經(jīng)毒素重鏈對Neuro-2a細胞的促神經(jīng)突起再生作用
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【摘要】:目的:觀察血清型A肉毒桿菌神經(jīng)毒素重鏈(botulinum neurotoxin serotype A heavy chain,Bo NT/A HC)對Neuro-2a細胞的促神經(jīng)突起再生作用并探討與其相關的細胞內(nèi)信號機制。方法:采用體外細胞培養(yǎng)技術,在培養(yǎng)液中加入不同濃度的Bo NT/A HC(0.01 nmol/L、0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L)進行干預,于24 h、48 h和72 h時收集細胞進行免疫熒光染色,再計算細胞突起長度及有突起細胞的百分比;在此基礎上,選擇最有效的Bo NT/A HC濃度作為處理劑量加入細胞培養(yǎng)液,于Bo NT/A HC作用后不同時點收集全細胞蛋白,采用Western blot檢測p-ERK1/2及p-Akt的蛋白水平。結(jié)果:當Bo NT/A HC濃度為0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L時,細胞突起的長度及有突起細胞的百分比與對照組相比皆明顯增加,差異顯著(P0.05),其中1 nmol/L效果最顯著。在細胞培養(yǎng)液內(nèi)加入1 nmol/L Bo NT/A HC后,p-ERK1/2的蛋白水平呈增加趨勢,其中Bo NT/A HC作用60 min后,p-ERK1/2的增加與對照組相比差異顯著(P0.05);與p-ERK1/2變化趨勢類似,細胞培養(yǎng)液內(nèi)加入1 nmol/L的Bo NT/A HC后,p-Akt的蛋白水平也呈增加趨勢,其中Bo NT/A HC作用15 min和60 min時,p-Akt增加顯著(P0.05)。結(jié)論:一定劑量的Bo NT/A HC可以促進神經(jīng)細胞突起再生和生長;Bo NT/A HC對Neuro-2a細胞的促神經(jīng)突起再生作用機制可能通過激活與神經(jīng)再生相關的信號蛋白ERK1/2和Akt的磷酸化而實現(xiàn)。
【作者單位】: 山西醫(yī)科大學病理生理教研室;蘭州大學第一醫(yī)院;
【關鍵詞】: 血清型A肉毒桿菌神經(jīng)毒素重鏈 Neuro-a細胞株 神經(jīng)突起再生 細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 蛋白激酶B
【基金】:國家自然科學基金資助項目(No.81171178) 山西省自然科學基金資助項目(No.2012011036-3) 山西省歸國人員科研基金資助項目(No.2013011054-2)
【分類號】:R392
【正文快照】: 肉毒桿菌神經(jīng)毒素(botulinum neurotoxin,Bo NT)是一種由肉毒桿菌產(chǎn)生并釋放的細菌外毒素,是一種致病力極強的神經(jīng)肌肉毒素,可導致致命肉毒癥。Bo NT也是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的致死率極強的生物毒素之一[1]。目前Bo NT已經(jīng)廣泛用于臨床治療與肌肉反應性過強相關的一些疾病,如斜視、
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本文編號:719512
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