本文關(guān)鍵詞：pcDNA3.1-HMOX1重組質(zhì)粒載體的構(gòu)建與鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建pc DNA3.1-HMOX1重組質(zhì)粒載體。方法使用基因合成法合成HMOX1基因,在其N端添加Kozak序列及His標簽序列,將擴增后的目的基因雙酶切連接至pc DNA3.1載體的Bam HⅠ和NotⅠ之間。轉(zhuǎn)化DH5α大腸桿菌后,挑取陽性克隆子進行質(zhì)粒抽提電泳及測序鑒定。結(jié)果 p CDNA3.1-HMOX1重組質(zhì)粒經(jīng)酶切電泳及DNA測序證實,目的基因HMOX1的序列完全正確,重組質(zhì)粒載體構(gòu)建成功。結(jié)論成功構(gòu)建p CDNA3.1-HMOX1融合基因并在DH5α大腸桿菌內(nèi)表達,為進一步探討HMOX1的生物學功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 廣東省中山市博愛醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心;廣東省中山市博愛醫(yī)院中心ICU;廣東省中山市博愛醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： HMOX 重組質(zhì)粒 載體構(gòu)建
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81101534) 廣東省自然科學基金資助項目(編號:S2012010010824) 廣東省醫(yī)學科研基金資助項目(編號:A2013875)
【分類號】：R346
【正文快照】： 血紅素加氧酶(heme oxygenase,HMOX)屬于微粒體催化酶,是血紅素降解的關(guān)鍵酶,可將血紅素分解產(chǎn)生一氧化碳、亞鐵離子和膽綠素[1]。HMOX主要存在兩種有活性的亞型,即HMOX1和HMOX2。不同的亞型組織學分布不同,其生物學功能亦有差異。HMOX1屬于誘導型酶,分布在所有細胞中;而HMOX2

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本文編號：717314