本文關(guān)鍵詞：乳桿菌對(duì)Staphylococcus aureus和Streptococcus pyogenes抑菌作用的研究

  更多相關(guān)文章： 乳桿菌 細(xì)菌性皮膚感染 金黃色葡萄球菌 化膿性鏈球菌 抑菌 有機(jī)酸 H_2O_2

【摘要】：細(xì)菌是皮膚表面最常見(jiàn)的微生物,細(xì)菌性皮膚感染也是最常見(jiàn)的皮膚感染疾病,細(xì)菌性皮膚感染常見(jiàn)的致病菌是金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌。細(xì)菌性皮膚感染通常表現(xiàn)為斑(片)、丘疹、丘皰疹、水皰、囊腫等原發(fā)性損傷,也可表現(xiàn)為脫屑、糜爛、潰瘍等繼發(fā)性損傷。目前,治療細(xì)菌性皮膚感染主要采用抗生素藥物。一些常用的抗生素類藥物有復(fù)方新諾明、四環(huán)素、利福平、氟喹諾酮等。但是,抗生素類藥物的大量使用,容易使致病菌產(chǎn)生抗藥性,引發(fā)更為嚴(yán)重的感染,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌所引發(fā)的社區(qū)獲得性皮膚感染就是一個(gè)很好的例子。另外,大量使用抗生素類藥物可能會(huì)引發(fā)其他種類致病菌的變異,對(duì)人體健康造成嚴(yán)重的不利影響。因此,找到一種對(duì)人體危害小甚至零危害的治療方法,將會(huì)對(duì)皮膚感染的治療具有十分重要的意義。 本研究的目的是分析乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)菌性皮膚感染主要致病菌(金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌)的抑制作用,分析乳桿菌用于治療細(xì)菌性皮膚感染的可行性。首先,篩選對(duì)金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌抑菌效果強(qiáng)的乳桿菌,采用的是基于雙層平板打孔法的抑菌試驗(yàn)。然后,檢測(cè)分析乳桿菌代謝產(chǎn)物中主要的抑菌物質(zhì)。包括以下四部分的試驗(yàn)：經(jīng)過(guò)不同處理的乳桿菌發(fā)酵上清液的抑菌試驗(yàn)；H+濃度對(duì)抑菌作用影響試驗(yàn)；基于雙層平板打孔法、高效液相色譜法(HPLC)和比色法,乳桿菌培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)酵上清液的抑菌活性、有機(jī)酸含量和H202含量的檢測(cè)試驗(yàn)；乳酸、乙酸和H202對(duì)的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)測(cè)定試驗(yàn)。最后,檢測(cè)分析抑菌效果強(qiáng)的四株乳桿菌用于商業(yè)化生產(chǎn)的可行性。包括以下三部分試驗(yàn)：乳桿菌所在屬種的鑒定試驗(yàn)；與用于治療細(xì)菌性皮膚感染的部分商品的對(duì)比試驗(yàn)；乳桿菌的安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)。 研究結(jié)果表明,乳桿菌在對(duì)金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌的抑菌試驗(yàn)中均有抑菌圈出現(xiàn),不同菌株所產(chǎn)生的抑菌圈直徑大小差別較大,乳桿菌發(fā)酵上清液對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌試驗(yàn)產(chǎn)生的抑菌圈大于化膿性鏈球菌。 乳桿菌的發(fā)酵上清液經(jīng)不同處理后的抑菌試驗(yàn)中,除H202后抑菌圈直徑都減小；除有機(jī)酸后檢測(cè)不到明顯的抑菌圈；除H202、除有機(jī)酸再濃縮10倍后可以檢測(cè)到直徑很小的明顯抑菌圈。無(wú)菌MRS(調(diào)pH分別為3.5、4.0、4.5)的抑菌試驗(yàn)中,pH為4.0、4.5的MRS液體培養(yǎng)基沒(méi)有檢測(cè)到抑菌圈；而pH為3.5的MRS液體培養(yǎng)基在對(duì)化膿性鏈球菌的抑菌試驗(yàn)中僅檢測(cè)到了較小的抑菌圈(8.46mm)。 乳桿菌培養(yǎng)過(guò)程中,抑菌活性大小KLDS1.0667KLDS1.0391KLDS1.0342-1KLDS1.0344 KLDS1.0203KLDS1.0210-1,乳酸含量大小：KLDS1.0391KLDS1.0667KLDS1.0342-1 KLDS1.0344KLDS1.0203KLDS1.0210-1,乙酸含量大小KLDS1.0667KLDS1.0391KLDS1.0342-1KLDS1.0344KLDS1.0203KLDS1.0210-1, H2O2含量大�。篕LDS1.0203KLDS1.0667KLDS1.0391KLDS1.0344KLDS1.0210-1KLDS1.0342-1=對(duì)金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌的MIC：H202乙酸乳酸,對(duì)金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌的MBC:H2O2乙酸乳酸。 KLDS1.0344、KLDS1.0667、KLDS1.0391為植物乳桿菌,KLDS1.0342-1為副干酪乳桿菌,與實(shí)驗(yàn)室菌種庫(kù)的命名和編號(hào)一致�；罹苿╊愃幬镏蟹蛛x出來(lái)的乳桿菌F1培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)酵上清液有機(jī)酸含量、H202含量和對(duì)指示菌的抑菌活性都較低。乳桿菌的安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)中,KLDS1.0344、KLDS1.0667、KLDS1.0342-1、KLDS1.0391對(duì)鏈霉素均具有抗性,KLDS1.0344對(duì)氨芐青霉素和慶大霉素還具有一定的抗性,對(duì)四環(huán)素、紅霉素、氯霉素敏感,KLDS1.0667、 KLDS1.0342-1、KLDS1.0391對(duì)氨芐青霉素、四環(huán)素、紅霉素、氯霉素、慶大霉素敏感；化膿性鏈球菌ATCC19615菌落周圍出現(xiàn)透明的溶血圈,KLDS1.0344、KLDS1.0667、KLDS1.0342-1、 KLDS1.0391菌落周圍沒(méi)有溶血圈出現(xiàn)。 本研究中,對(duì)細(xì)菌性皮膚感染主要致病菌抑菌效果最強(qiáng)的乳桿菌為植物乳桿菌KLDS1.0344、 KLDS1.0667、 KLDS1.0391,副干酪乳桿菌KLDS1.0342-1。乳桿菌代謝產(chǎn)物中最主要的抑菌物質(zhì)是乳酸,乙酸和H2O2對(duì)乳桿菌的抑菌活性也有影響。對(duì)金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌抑菌和殺菌作用的大�。篐2O2乙酸乳酸。植物乳桿菌KLDS1.0667、KLDS1.0391對(duì)細(xì)菌性皮膚感染常見(jiàn)致病菌的抑菌效果強(qiáng),對(duì)常見(jiàn)的五種抗生素抗性小,沒(méi)有溶血性。
【關(guān)鍵詞】：乳桿菌 細(xì)菌性皮膚感染 金黃色葡萄球菌 化膿性鏈球菌 抑菌 有機(jī)酸 H_2O_2
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R371;TQ920.1
【目錄】：

• 摘要8-10
• Abstract10-13
• 1 前言13-25
• 1.1 立題背景13-14
• 1.2 文獻(xiàn)綜述14-23
• 1.2.1 細(xì)菌性皮膚感染及治療方法14-19
• 1.2.2 乳桿菌治療細(xì)菌性皮膚感染的理論依據(jù)19-21
• 1.2.3 乳桿菌治療細(xì)菌性皮膚感染的研究現(xiàn)狀21-23
• 1.3 本研究的目的和意義23-24
• 1.4 本研究采用的技術(shù)路線24-25
• 2 材料與方法25-36
• 2.1 試驗(yàn)材料25-30
• 2.1.1 供試菌株25-27
• 2.1.2 培養(yǎng)基27-28
• 2.1.3 主要試劑28-29
• 2.1.4 主要溶液的配制29
• 2.1.5 主要儀器及設(shè)備29-30
• 2.2 試驗(yàn)方法30-36
• 2.2.1 供試菌株的活化與培養(yǎng)30
• 2.2.2 對(duì)指示菌具有抑制作用乳桿菌的初步篩選30-31
• 2.2.3 乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)指示菌的抑制作用31
• 2.2.4 H~+濃度對(duì)抑菌作用的影響31-32
• 2.2.5 乳桿菌在培養(yǎng)過(guò)程中抑菌活性、主要有機(jī)酸以及H_2O_2含量的測(cè)定32
• 2.2.6 乳酸、乙酸和H_2O_2最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)的測(cè)定32-33
• 2.2.7 菌株鑒定33-34
• 2.2.8 用于治療細(xì)菌感染的部分商品對(duì)指示菌的抑制作用34
• 2.2.9 乳桿菌的安全性評(píng)價(jià)34-36
• 3 結(jié)果與分析36-57
• 3.1 對(duì)指示菌具有抑制作用的乳桿菌的初步篩選36-38
• 3.2 乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)指示菌的抑制作用38-40
• 3.2.1 乳桿菌代謝產(chǎn)物經(jīng)不同處理后的抑菌作用38-40
• 3.2.2 上清液中H~+濃度對(duì)抑菌作用的影響40
• 3.3 乳桿菌在培養(yǎng)過(guò)程中抑菌活性、主要有機(jī)酸含量及H_2O_2含量40-47
• 3.3.1 乳桿菌在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)酵上清液的抑菌活性40-43
• 3.3.2 乳桿菌在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)酵上清液中有機(jī)酸含量的測(cè)定43-46
• 3.3.3 乳桿菌在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)酵上清液中H_2O_2含量的測(cè)定46-47
• 3.4 乳酸、乙酸和H_2O_2最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)的測(cè)定47-49
• 3.4.1 MIC的測(cè)定結(jié)果47-48
• 3.4.2 MBC的測(cè)定結(jié)果48-49
• 3.5 菌株的鑒定49-51
• 3.6 用于治療細(xì)菌感染的部分商品對(duì)指示菌的抑制作用51-53
• 3.6.1 抗生素類藥物對(duì)指示菌的抑制作用51
• 3.6.2 活菌制劑類藥物對(duì)指示菌的抑制作用51-53
• 3.7 乳桿菌的安全性評(píng)價(jià)53-57
• 3.7.1 抗生素抗性試驗(yàn)53-56
• 3.7.2 溶血性試驗(yàn)56-57
• 4 討論57-63
• 4.1 乳桿菌代謝產(chǎn)物中主要抑菌物質(zhì)的探究57
• 4.2 乳桿菌培養(yǎng)過(guò)程中抑菌活性、主要有機(jī)酸含量及H_2O_2含量的測(cè)定57-59
• 4.2.1 抑菌活性的測(cè)定57-58
• 4.2.2 主要有機(jī)酸含量的測(cè)定58
• 4.2.3 H_2O_2含量的測(cè)定58-59
• 4.3 乳酸、乙酸和H_2O_2對(duì)指示菌MIC和MBC的測(cè)定59-60
• 4.4 菌株鑒定方法60
• 4.5 用于治療細(xì)菌性皮膚感染的部分商品對(duì)指示菌的抑制作用分析60-61
• 4.6 乳桿菌的安全性評(píng)價(jià)61-63
• 5 結(jié)論63-64
• 致謝64-65
• 參考文獻(xiàn)65-71
• 附錄71-75
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文75

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本文編號(hào)：703960