本文關鍵詞：用非整合重編程技術構建人外周血單個核細胞來源的誘導多能干細胞

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【摘要】：目的用非整合重編程技術構建人外周血單個核細胞(PBMC)來源誘導多能干細胞(i PSC)。方法收集健康人外周血標本,分離PBMC,用含4個重編程轉錄因子(OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC)的仙臺病毒感染PBMC,并用無飼養(yǎng)層細胞的培養(yǎng)體系培育獲得i PSC。通過細胞形態(tài)學、堿性磷酸酶(AP)染色、免疫熒光染色、擬胚體形成和分化實驗對i PSC細胞進行多能性驗證;用核型分析和仙臺病毒基因組RNA檢測對其進行安全性驗證。結果在仙臺病毒感染后16 d后,PBMC出現(xiàn)i PSC樣克隆。i PSC可進行傳代培養(yǎng),且經多能性驗證實驗證明其具有多能性;安全性驗證結果表明,i PSC核型正常,外源性病毒基因組RNA可被完全清除。結論建立了對PBMC進行非整合重編程的誘導體系,并獲得了具有多能性、核型正常且不含外源基因的i PSC。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學附屬南京婦幼保健院產前診斷中心;
【關鍵詞】： 人外周血單個核細胞 重編程 誘導多能干細胞 非整合 仙臺病毒
【基金】：國家自然科學基金(81300495) 江蘇省臨床醫(yī)學重點項目(BL2012039) 江蘇省衛(wèi)生廳科學項目(H201343)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 2006年,日本科學家Shinya Yamanaka首次通過4個重要的轉錄因子OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC實現(xiàn)對已分化體細胞的重編程,從而得到與胚胎干細胞類似的誘導多能干細胞(i PSC)[1]。目前,包括皮膚成纖維細胞、脂肪細胞、牙髓細胞等在內的人類細胞重編程技術已非常完善[2-4],然而,對

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