本文關(guān)鍵詞：基于Luminex技術(shù)的多組分百日咳疫苗血清抗體效價(jià)快速檢測方法的建立

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【摘要】：目的建立基于Luminex技術(shù)的多組分百日咳疫苗血清抗體效價(jià)快速檢測方法。方法將百日咳類毒素(pertussis toxin,PT)、絲狀血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)、百日咳桿菌黏附素(pertactin,PRN)、百日咳菌鞭毛蛋白2,3型(fimbrial-2 and fimbrial-3,FIM 2,3)分別與4種不同型號的微球耦聯(lián),耦聯(lián)的抗原在同一孔中與血清孵育,通過生物素標(biāo)記抗體和鏈霉素標(biāo)記藻紅蛋白雙重識別,用Luminex熒光檢測得到熒光中位數(shù)值(MFI),進(jìn)行效價(jià)分析,并通過百日咳標(biāo)準(zhǔn)血清建立五組分百日咳疫苗血清抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線。采用ELISA法檢測同一組血清樣品中的抗體效價(jià),并對兩種方法的檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果與ELISA法相比,Luminex法的線性范圍更寬。兩種方法檢測五組分百日咳疫苗血清抗體效價(jià)的分布范圍接近,Luminex法檢測50份五組分百日咳疫苗免疫小鼠血清抗體效價(jià)的平均值分別為PT 65.365 IU/ml、FIM 15.052 IU/ml、FHA 545.236 IU/ml、PRN 7.876 IU/ml,ELISA法檢測的平均值分別為PT 72.640 IU/ml、FIM 16.480 IU/ml、FHA 589.474 IU/ml、PRN 7.345 IU/ml,兩種檢測方法的檢測結(jié)果具有良好的相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)(R2)分別為:PT 0.905 8、FIM 0.979 1、FHA 0.930 9、PRN 0.997 6。結(jié)論與ELISA法相比,基于Luminex的多重分析物的檢測方法具有減少樣品消耗量、節(jié)省成本和測定時(shí)間、使多種目標(biāo)分子之間相關(guān)性的分析更準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),可用于五組分百日咳疫苗血清抗體效價(jià)的檢測。
【作者單位】： 天津科技大學(xué);中國食品藥品檢定研究院百白破疫苗和毒素室;天津康希諾生物技術(shù)有限公司天津市呼吸道細(xì)菌重組及結(jié)合疫苗企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 百日咳疫苗 效價(jià) Luminex 多重檢測 酶聯(lián)免疫吸附測定
【基金】：863計(jì)劃“基因重配多價(jià)輪狀病毒等新型疫苗研發(fā)技術(shù)及產(chǎn)品研發(fā)”(2012AA02A401)
【分類號】：O657.3;R392-33
【正文快照】： 百日咳是一種嚴(yán)重威脅嬰幼兒健康的呼吸道傳染性疾病,即使在疫苗接種覆蓋率較高的國家,百日咳仍是一個(gè)深受關(guān)注的公共衛(wèi)生問題[1]。最早使用的百日咳疫苗為全細(xì)胞疫苗,雖然這種疫苗具有良好的保護(hù)效果,但在接種過程中會(huì)伴隨較嚴(yán)重的副作用[2],因此,自20世紀(jì)80年代以來,全細(xì)胞

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中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孔祥峰;胡元亮;芮榮;王德云;李祥瑞;;中藥成分對免疫雛雞外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和血清抗體效價(jià)的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2004學(xué)術(shù)年會(huì)暨第五屆全國畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下冊）[C];2004年

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本文編號：653841