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抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒結(jié)構(gòu)蛋白單克隆抗體的制備和功能分析

發(fā)布時(shí)間:2017-08-09 15:29

  本文關(guān)鍵詞:抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒結(jié)構(gòu)蛋白單克隆抗體的制備和功能分析


  更多相關(guān)文章: 發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV) 核蛋白(NP) 糖蛋白(GP) 單克隆抗體


【摘要】:為制備抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)結(jié)構(gòu)蛋白的單克隆抗體,本研究用滅活純化的SFTSV病毒顆粒免疫BALB/c小鼠,利用雜交瘤技術(shù)獲得分別分泌抗糖蛋白單抗和核蛋白單抗的雜交瘤細(xì)胞株。用免疫熒光法和免疫沉淀方法對(duì)制備的單克隆抗體的抗原特異性進(jìn)行鑒定,并初步進(jìn)行單抗效價(jià)、中和活性及親和力等功能分析。結(jié)果顯示,通過細(xì)胞融合和克隆化,共篩選出13株穩(wěn)定分泌抗糖蛋白(Glycoprotein,GP)單抗和7株穩(wěn)定分泌抗核蛋白(Nucleoprotein,NP)單抗的雜交瘤細(xì)胞株。免疫熒光和免疫沉淀鑒定顯示獲得的單抗有良好的抗原特異性。抗GP單抗中6株針對(duì)Gn,7株針對(duì)Gc,大部分的間接免疫熒光(Indirect immunofluorescence assay,IFA)滴度在1 280~20 480之間,其中4株抗Gn單抗具有中和活性。獲得的7株抗NP單抗均與NP特異性結(jié)合,IFA滴度范圍在5 120~20 480,均無中和活性。此外,經(jīng)非競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)的兩株抗GP單抗(1C8和1G8)均有較高親和力。本研究為SFTS診斷方法的發(fā)展及SFTSV致病機(jī)制研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)病毒和病毒病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV) 核蛋白(NP) 糖蛋白(GP) 單克隆抗體
【基金】:“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng):發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒滅活疫苗的研制(2013ZX09102029) 國(guó)家自然科學(xué)基金:SFTS布尼亞病毒轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件的鑒定及功能研究(31270201)
【分類號(hào)】:R392;R373
【正文快照】: 發(fā)熱伴血小板減少綜合征(Sever fever withthrombocytopenia syndrome,SFTS)是我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)和命名的具有重要公共衛(wèi)生意義的新發(fā)傳染病。臨床表現(xiàn)主要為急性發(fā)熱伴血小板和白細(xì)胞減少,常伴有胃腸道癥狀,神經(jīng)癥狀,多功能臟器損傷等癥狀。目前已確定該新發(fā)傳染病病原為布尼亞病

【相似文獻(xiàn)】

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中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 編譯 李勇;單克隆抗體:生物類似藥開發(fā)的秘鑰[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

3 廣凱;單克隆抗體藥物將有大發(fā)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

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7 尹暉;全球最大單克隆抗體研制基地落戶無錫[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

8 尹暉;最大單克隆抗體研制項(xiàng)目在馬山奠基[N];無錫日?qǐng)?bào);2010年

9 數(shù)文;羅氏買進(jìn)抗癌單克隆抗體[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

10 毛文波;單克隆抗體:征服癌癥的新方法[N];科技日?qǐng)?bào);2004年

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本文編號(hào):646009

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