本文關鍵詞：家蠅溶菌酶MDLZM基因克隆、表達和序列分析

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【摘要】：目的探討家蠅溶菌酶(MDLZM)基因及編碼的蛋白質結構和特征。方法利用美國國家生物技術信息中心和瑞士生物信息學研究所的蛋白分析專家系統(tǒng)中有關基因和蛋白序列的分析工具,結合其他生物信息學分析軟件包,從Gen Bank上家蠅基因組序列識別出編碼MDLZM的基因,分析預測該蛋白質的結構功能;設計引物PCR擴增MDLZM基因,將其克隆到原核表達質粒PEASY-E1中,重組質粒在大腸桿菌中的表達產(chǎn)物用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)鑒定。結果 MDLZM基因序列最大開放閱讀框(ORF)為435 bp,編碼145個氨基酸,理論分子量為15 958.4 Da,等電點為8.65;構建的重組質粒經(jīng)PCR、雙酶切及測序鑒定確為MDLZM基因;SDS-PAGE分析結果顯示,重組質粒可在大腸桿菌Origmi B/DE3中表達,表達產(chǎn)物純化后得到的融合蛋白相對分子質量約為15958.4 Da,誘導18 h蛋白表達量最高,SDS-PAGE鑒定得到的蛋白條帶與目的蛋白大小相符。結論成功構建PEASY-E1-MDLZM重組原核表達質粒并表達出融合MDLZM蛋白。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學院寄生蟲學教研室;皖北礦務局煤電集團總醫(yī)院普外科;貴州省疾病預防控制中心;
【關鍵詞】： 家蠅 家蠅溶菌酶(MDLZM) 克隆 表達 序列分析
【基金】：國家自然科學基金(81360254) 國家科技支撐計劃課題(2011BAC06B12)
【分類號】：R384.2
【正文快照】： 溶菌酶(lysozyme,LZM)在機體的先天免疫中發(fā)揮重要作用,具有破壞菌體胞壁,導致細菌死亡的作用。廣泛分布于生物體的體液、組織液[1]。根據(jù)來源不同分為:T4噬菌體溶菌酶、植物溶菌酶、微生物溶菌酶和動物溶菌酶,動物溶菌酶細分為:C型(chicken-lysozyme type)、G型(goose-type)[

【共引文獻】

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本文編號：618886