本文關(guān)鍵詞：短期凍存兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)其增殖及成骨分化潛能的影響

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【摘要】：目的探討短期凍存對(duì)兔BMSCs的增殖、生物特征及成骨能力的影響，為進(jìn)一步研究作基礎(chǔ)。方法第5代兔BMSCs凍存，30d后復(fù)蘇、體外培養(yǎng)至第10代，，設(shè)相同代數(shù)未凍存的BMSCs為對(duì)照組。MTT、細(xì)胞周期、細(xì)胞表面標(biāo)志及成骨誘導(dǎo)分化后ALP含量、Ⅰ型膠原及鈣結(jié)節(jié)染色作為其增殖、生物特征及成骨能力的評(píng)價(jià)指標(biāo)。結(jié)果凍存后BMSCs存活率為（84.38±3.78）%，生長(zhǎng)潛伏期延長(zhǎng)，傳代后逐漸恢復(fù)；增殖指數(shù)和G1期細(xì)胞所占比例分別為（42.9±3.4）%、（57.0±3.4）%，細(xì)胞表面標(biāo)志CD44陽(yáng)性率為（93.62±1.05）%，不表達(dá)CD45；成骨誘導(dǎo)第7、14dALP含量（U/gprot）分別為6.73±1.92、15.99±4.36，第14、21天，Ⅰ型膠原、鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色陽(yáng)性；以上結(jié)果與未凍存組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論短期凍存對(duì)兔BMSCs增殖、生物特征及成骨分化潛能無(wú)明顯影響，凍存后可繼續(xù)進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 凍存 增殖 生物特性 成骨分化
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 目錄3-6
• 中文摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 英漢縮略詞對(duì)照表9-11
• 前言11-12
• 1 材料與方法12-32
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及材料12-14
• 1.2.1 主要試驗(yàn)試劑12-14
• 1.2.2 主要試驗(yàn)耗材14
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器14-15
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法15-32
• 1.4.1 主要液體配制15-17
• 1.4.2 兔 BMSCs 原代分離、培養(yǎng)17-18
• 1.4.3 兔 BMSCs 傳代培養(yǎng)18
• 1.4.4 兔 BMSCs 的冷凍保存18-19
• 1.4.5 兔 BMSCs 復(fù)蘇19
• 1.4.6 復(fù)蘇細(xì)胞的活性檢測(cè)19
• 1.4.7 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察19-20
• 1.4.8 MTT 比色法繪制生長(zhǎng)曲線20
• 1.4.9 細(xì)胞周期檢測(cè)20
• 1.4.10 兔 BMSCs 表型檢測(cè)20-21
• 1.4.11 向成骨細(xì)胞分化能力的檢測(cè)21-24
• 1.4.11.1 堿性磷酸酶（ ALP ）含量檢測(cè)21-22
• 1.4.11.2 Ⅰ型膠原蛋白免疫組織化學(xué)染色（SP 法）22-23
• 1.4.11.3 鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色23-24
• 1.4.12 向成骨細(xì)胞分化相關(guān)調(diào)控因子的檢測(cè)24-31
• 1.4.13 觀察指標(biāo)31
• 1.4.14 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析31-32
• 2 結(jié)果32-42
• 2.1 BMSCs 的培養(yǎng)情況32-33
• 2.2 BMSCs 存活率及生長(zhǎng)曲線33-34
• 2.3 BMSCs 表面抗原表達(dá)情況34-36
• 2.4 BMSCs 細(xì)胞周期檢測(cè)36-37
• 2.5 ALP 表達(dá)情況37-38
• 2.6 Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色38-39
• 2.7 鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色39-40
• 2.8 成骨細(xì)胞分化相關(guān)調(diào)控因子的檢測(cè)40-42
• 3 討論42-52
• 3.1 BMSCs 的概況及分離培養(yǎng)42-44
• 3.2 BMSCs 的凍存、復(fù)蘇44-45
• 3.3 短期凍存后 BMSCs 的生物特性45-48
• 3.4 短期凍存后 BMSCs 向成骨細(xì)胞分化的能力48-50
• 3.5 成骨細(xì)胞分化相關(guān)調(diào)控因子的檢測(cè)50-52
• 4 結(jié)論52-53
• 綜述53-62
• 參考文獻(xiàn)62-74
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄74-75
• 致謝75

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 陳小伍;方馳華;劉勝軍;戎禎祥;;短期凍存對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年02期

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本文編號(hào)：603451