本文關(guān)鍵詞：優(yōu)良雙歧桿菌的篩選及其生理功能研究

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【摘要】：雙歧桿菌作為人和動(dòng)物腸道益生菌群的重要組成部分，具有促進(jìn)體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收、生物拮抗作用、提高免疫力和抗癌等生理功能。本課題從健康新生兒、嬰兒及成人糞便中有目的性、針對(duì)性地篩選到一株耐酸、耐膽鹽的雙歧桿菌，并對(duì)其益生功能進(jìn)行了研究。主要研究成果如下： (1)雙歧桿菌的篩選和鑒定。利用添加X(jué)-Gal的改良MRS作為選擇性培養(yǎng)基初篩得到75株疑似雙歧桿菌的菌株，經(jīng)耐酸耐膽鹽復(fù)篩、生理生化鑒定及分子生物學(xué)鑒定后，確定一株優(yōu)良菌株NCU712為長(zhǎng)雙歧桿菌。 (2) NCU712的生長(zhǎng)曲線。NCU712代謝葡萄糖產(chǎn)生乳酸、乙酸等有機(jī)酸，0-4h為延滯期，4-16h為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，16-24h為穩(wěn)定期，24h之后，菌體進(jìn)入衰亡期。 (3) NCU712的胃腸道耐受性研究。在胃液pH2.5和3.0時(shí)，NCU712的D值分別為30.42、92.97min；菌體在胃液pH3.5和4.0的環(huán)境中，活菌數(shù)在培養(yǎng)過(guò)程中略有上升。人工腸液作用4.0h后，活菌數(shù)仍有108CFU/mL，且在0.30%膽鹽環(huán)境中培養(yǎng)24h后，活菌數(shù)僅下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。 (4) NCU712的黏附性能研究。穩(wěn)定期黏附性能最好，當(dāng)菌體濃度108CFU/mL時(shí)，NCU712的黏附指數(shù)隨菌體濃度升高而增大，隨后黏附指數(shù)變化不顯著；共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)菌體黏附性能影響在作用2.0h之后達(dá)到飽和；NCU712在中性環(huán)境的黏附性能最好。 (5) NCU712的抗氧化性能研究。增大樣品加入量，，活菌體、菌體破碎物、CFS的DPPH、羥自由基清除率、總還原力、抗脂質(zhì)過(guò)氧化率等抗氧化性能指標(biāo)均升高，且CFS的DPPH清除率遠(yuǎn)高于陽(yáng)性對(duì)照Vit C的清除率，最高可達(dá)100%，羥自由基清除率活菌體最高，CFS次之。 (6) NCU712的抑菌性能研究。NCU712對(duì)7株常見(jiàn)致病菌有較好的抑菌效果，且發(fā)酵液抑菌性普遍比無(wú)菌上清液好。抑菌圈直徑大小隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)而增大，當(dāng)發(fā)酵時(shí)間大于28h時(shí)，抑菌圈直徑變化不顯著。NCU712的代謝產(chǎn)物可延長(zhǎng)沙門氏菌的延滯期，縮短對(duì)數(shù)期，當(dāng)添加量大于12%時(shí)，沙門氏菌的生長(zhǎng)被完全抑制，說(shuō)明NCU712對(duì)沙門氏菌的生長(zhǎng)有較好的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：雙歧桿菌 選育 胃腸道耐受性 黏附性能 抗氧化性能 抑菌性能
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R371
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-11
• 第1章 引言11-19
• 1.1 雙歧桿菌生物學(xué)特性11-12
• 1.1.1 形態(tài)特征11
• 1.1.2 代謝途徑11
• 1.1.3 生物學(xué)分類及存在11-12
• 1.2 雙歧桿菌生理作用12-16
• 1.2.1 營(yíng)養(yǎng)作用12
• 1.2.2 抑菌性能12-14
• 1.2.3 通便功能14-15
• 1.2.4 抗衰老功能15
• 1.2.5 防止心血管疾病15-16
• 1.2.6 提高免疫力和抗癌16
• 1.3 雙歧桿菌分離篩選的研究進(jìn)展16-17
• 1.3.1 胃腸道耐受性良好的菌株篩選16
• 1.3.2 耐氧能力良好的菌株篩選16-17
• 1.3.3 高黏附能力的菌株篩選17
• 1.4 研究?jī)?nèi)容及意義17-19
• 1.4.1 研究?jī)?nèi)容17
• 1.4.2 技術(shù)路線17-18
• 1.4.3 研究意義18-19
• 第2章 雙歧桿菌篩選分離及鑒定19-26
• 2.1 試驗(yàn)材料19-20
• 2.1.1 供分離樣品19
• 2.1.2 培養(yǎng)基及緩沖液19
• 2.1.3 藥品與試劑19-20
• 2.1.4 主要儀器與設(shè)備20
• 2.2 試驗(yàn)方法20-21
• 2.2.1 初篩20
• 2.2.2 耐酸、耐膽鹽復(fù)篩20-21
• 2.2.3 形態(tài)學(xué)及生理生化鑒定21
• 2.2.4 分子生物學(xué)鑒定21
• 2.3 結(jié)果分析21-25
• 2.3.1 雙歧桿菌初篩21-22
• 2.3.2 耐酸耐膽鹽復(fù)篩22
• 2.3.3 形態(tài)及生理生化鑒定22-24
• 2.3.4 分子生物學(xué)鑒定24-25
• 2.4 本章小結(jié)25-26
• 第3章 生長(zhǎng)曲線的繪制26-31
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料26-27
• 3.1.1 培養(yǎng)基及緩沖液26
• 3.1.2 藥品與試劑26
• 3.1.3 主要儀器與設(shè)備26-27
• 3.2 試驗(yàn)方法27-28
• 3.2.1 吸光度的測(cè)定27
• 3.2.2 酸度的測(cè)定27-28
• 3.2.3 葡萄糖和有機(jī)酸的測(cè)定28
• 3.3 結(jié)果分析28-30
• 3.3.1 活菌數(shù)及吸光度值的變化28-29
• 3.3.2 酸度及 pH 值的變化29
• 3.3.3 葡萄糖及有機(jī)酸的變化29-30
• 3.4 本章小結(jié)30-31
• 第4章 胃腸道耐受性研究31-35
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料31-32
• 4.1.1 培養(yǎng)基及緩沖液31
• 4.1.2 藥品與試劑31
• 4.1.3 主要儀器與設(shè)備31-32
• 4.2 試驗(yàn)方法32
• 4.2.1 人工胃液耐受性試驗(yàn)32
• 4.2.2 人工腸液耐受性試驗(yàn)32
• 4.2.3 耐膽鹽試驗(yàn)32
• 4.3 結(jié)果分析32-34
• 4.3.1 人工胃液耐受性32-33
• 4.3.2 人工腸液耐受性33-34
• 4.3.3 耐膽鹽實(shí)驗(yàn)34
• 4.4 本章小結(jié)34-35
• 第5章 黏附性能研究35-41
• 5.1 實(shí)驗(yàn)材料35-36
• 5.1.1 細(xì)胞來(lái)源35
• 5.1.2 培養(yǎng)基及緩沖液35
• 5.1.3 藥品與試劑35-36
• 5.1.4 主要儀器與設(shè)備36
• 5.2 試驗(yàn)方法36-37
• 5.2.1 黏附實(shí)驗(yàn)36
• 5.2.2 生長(zhǎng)階段對(duì)黏附作用的影響36-37
• 5.2.3 菌體濃度對(duì)黏附作用的影響37
• 5.2.4 作用時(shí)間對(duì)黏附作用的影響37
• 5.2.5 環(huán)境 pH 值對(duì)黏附作用的影響37
• 5.3 結(jié)果分析37-40
• 5.3.1 生長(zhǎng)階段對(duì)黏附作用的影響37-38
• 5.3.2 菌體濃度對(duì)黏附作用的影響38
• 5.3.3 共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黏附作用的影響38-39
• 5.3.4 環(huán)境 pH 值對(duì)黏附作用的影響39-40
• 5.4 本章小結(jié)40-41
• 第6章 抗氧化性能研究41-48
• 6.1 實(shí)驗(yàn)材料41-42
• 6.1.1 培養(yǎng)基及緩沖液41
• 6.1.2 藥品與試劑41-42
• 6.1.3 主要儀器與設(shè)備42
• 6.2 試驗(yàn)方法42-44
• 6.2.1 樣品處理42
• 6.2.2 DPPH 自由基清除率的測(cè)定42
• 6.2.3 羥自由基清除率的測(cè)定42-43
• 6.2.4 總還原力的測(cè)定43
• 6.2.5 抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力的測(cè)定43-44
• 6.3 結(jié)果分析44-47
• 6.3.1 DPPH 自由基清除率的測(cè)定44-45
• 6.3.2 羥自由基清除率的測(cè)定45
• 6.3.3 總還原力的測(cè)定45-46
• 6.3.4 抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力的測(cè)定46-47
• 6.4 本章小結(jié)47-48
• 第7章 抑菌性能研究48-54
• 7.1 實(shí)驗(yàn)材料48-49
• 7.1.1 菌體來(lái)源48
• 7.1.2 培養(yǎng)基及緩沖液48
• 7.1.3 藥品與試劑48
• 7.1.4 主要儀器與設(shè)備48-49
• 7.2 試驗(yàn)方法49-50
• 7.2.1 發(fā)酵液及上清液的抑菌性49
• 7.2.2 不同生長(zhǎng)階段的發(fā)酵液及上清液的抑菌性49
• 7.2.3 NCU712 對(duì)沙門氏菌生長(zhǎng)的影響49-50
• 7.3 結(jié)果與分析50-53
• 7.3.1 發(fā)酵液及上清液的抑菌性50-51
• 7.3.2 不同生長(zhǎng)階段的抑菌性51-52
• 7.3.3 NCU712 對(duì)沙門氏菌生長(zhǎng)的影響52-53
• 7.4 本章小結(jié)53-54
• 第8章 結(jié)論與展望54-56
• 8.1 結(jié)論54-55
• 8.2 展望55-56
• 致謝56-57
• 參考文獻(xiàn)57-65
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果65

【參考文獻(xiàn)】

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