microRNA-1和microRNA-133參與小鼠誘導(dǎo)多能干細(xì)胞向心肌的分化
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【摘要】:目的研究microRNA-1(miRNA-1)和microRNA-133(miRNA-133)對小鼠誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(mi PSCs)向心肌分化的影響。方法 RT-PCR分析mi PSC分化過程中microRNA-1和microRNA-133的表達(dá)變化;microRNA-1和micro-133反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染mi PSCs,增強(qiáng)miRNA-1和miRNA-133表達(dá);并按照轉(zhuǎn)染分子的不同,將細(xì)胞分為對照組(添加miRNA-U6)、miRNA-1組、miRNA-133組和miRNA-1+miRNA-133組。RT-PCR、q-PCR和免疫熒光化學(xué)染色檢測miRNA轉(zhuǎn)染并誘導(dǎo)mi PSCs分化后,各組細(xì)胞內(nèi)miRNA-1和miRNA-133的表達(dá)變化以及心肌細(xì)胞相關(guān)特異性基因和蛋白的變化。結(jié)果 mi PSCs心肌分化過程中miRNA-1,miRNA-133的表達(dá)具有差異性,均在后期有顯著增高(P0.01);在分化過程中單獨過表達(dá)miRNA-1和miRNA-133對心肌的分化并未有促進(jìn)作用,但共表達(dá)miRNA-1和miRNA-133后,卻顯著增加心肌細(xì)胞的搏動數(shù)量和心肌基因的表達(dá),并且促進(jìn)了心肌細(xì)胞成熟。結(jié)論 miRNA-1和miRNA-133通過協(xié)同作用促進(jìn)mi PSCs體外分化為心肌細(xì)胞,顯著提高mi PSC向心肌細(xì)胞定向分化效率。
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】: microRNA 誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞 心肌細(xì)胞
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目資助(31271039);國家自然科學(xué)基金項目資助(31400832)
【分類號】:R329
【正文快照】: 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,i PSC),是2006年日本科學(xué)家Takahashi和Yamanaka成功獲得的類似于胚胎干細(xì)胞(embryonic stemcells,ESC)的多能干細(xì)胞,命名為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,其具有無限制自我更新能力和多向分化潛能,處于細(xì)胞發(fā)育過程的原始階段[1,2]。微小RNA
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,本文編號:594063
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