本文關(guān)鍵詞：驅(qū)動(dòng)蛋白Kif18A多克隆抗體的制備、純化及免疫特異性檢測(cè)

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【摘要】：采用標(biāo)簽蛋白誘導(dǎo)表達(dá)純化、蛋白質(zhì)譜、Western Blot、免疫熒光染色等多種分子生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)方法,探究了一種制備蛋白特異性多克隆抗體、檢測(cè)抗體并且運(yùn)用抗體獲得蛋白翻譯后修飾信息的實(shí)驗(yàn)思路.結(jié)果表明,使用這種方法可以高效地得到Kif18A的兔源多克隆抗體.得到的抗體血清可以很好地應(yīng)用于Western Blot(蛋白免疫印跡)、Co-IP(免疫共沉淀)等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn).將抗體血清純化后可以應(yīng)用于免疫熒光染色實(shí)驗(yàn),并可以獲得良好清晰的實(shí)驗(yàn)結(jié)果.此外,利用制備出的Kif18A特異性抗體對(duì)細(xì)胞內(nèi)源性Kif18A進(jìn)行Co-IP實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行質(zhì)譜分析,得到了內(nèi)源性Kif18A蛋白翻譯后的修飾信息,為研究Kif18A蛋白的定位與功能奠定了良好的基礎(chǔ).
【作者單位】： 天津師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 驅(qū)動(dòng)蛋白KifA 多克隆抗體 蛋白質(zhì)譜 蛋白磷酸化
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31271485);國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(31301138) 2011年教育部“新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃”資助項(xiàng)目(NCET-11-1066) 天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(12JC2DJC21400)
【分類號(hào)】：Q51;R392
【正文快照】： 在已知的40余種驅(qū)動(dòng)蛋白(kinesin)分子中,Kif18A蛋白近年來(lái)受到了越來(lái)越多的關(guān)注.在先前的文獻(xiàn)中報(bào)道,Kif18A蛋白分子在體外實(shí)驗(yàn)中證實(shí)具有微管解聚活性.這不同于早期報(bào)道中典型的驅(qū)動(dòng)蛋白分子的特性.先前認(rèn)為驅(qū)動(dòng)蛋白家族分子中有些具有微管解聚酶功能(如Kif2C,即MCAK蛋白),

【相似文獻(xiàn)】

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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3 岳e，

本文編號(hào)：568631