本文關(guān)鍵詞：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白對(duì)帕金森病模型小鼠的作用及其機(jī)制研究

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【摘要】：靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白（Fungal Immunomodulatory Protein of Ganodermalucidium，LZ-8）是從赤靈芝菌絲體提取物中分離出的一種免疫調(diào)節(jié)蛋白，研究發(fā)現(xiàn)其具有促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖、抑制全身性過(guò)敏反應(yīng)、抑制器官移植后的排斥反應(yīng)以及抑制腫瘤等生物學(xué)活性。本論文使用的重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白(recombinant Ganoderma lucidum immunoregulatory protein，rLZ-8)，是應(yīng)用基因工程方法，重新設(shè)計(jì)編碼LZ-8的蛋白基因，在畢赤酵母中分泌表達(dá)后得到的大量具有高純度和穩(wěn)定生物活性的rLZ-8樣品。 帕金森病(Parkinson’s Disease，PD)是中老年最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病之一，其主要病理特征是中腦黑質(zhì)多巴胺(dopamine，DA)能神經(jīng)元的緩慢、進(jìn)行性變性死亡。在對(duì)其發(fā)病機(jī)制的研究領(lǐng)域，氧化應(yīng)激損傷和神經(jīng)炎癥反應(yīng)是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)之一。PD發(fā)生后，機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激損傷，細(xì)胞免疫、體液免疫及各種細(xì)胞因子水平也發(fā)生變化，除此之外還伴隨著神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活性和數(shù)量的改變。研究也證實(shí)，一些抗炎類(lèi)藥物，可能對(duì)黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元有保護(hù)作用。因此設(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)，探索rLZ-8是否對(duì)PD具有保護(hù)作用，并探索rLZ-8是否能通過(guò)抑制氧化應(yīng)激和抑制炎癥反應(yīng)來(lái)發(fā)揮其作用。 實(shí)驗(yàn)選用C57BL/6小鼠120只，隨機(jī)分為6組：正常對(duì)照組、PD模型組、美多芭組（陽(yáng)性藥組）、rLZ-8低劑量組、rLZ-8中劑量組、rLZ-8高劑量組，每組20只。小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine，MPTP，30mg/kg/day），，連續(xù)給藥5天建立PD模型。 MPTP首次注射9天前，正常對(duì)照組和PD模型組腹腔注射生理鹽水，陽(yáng)性藥組灌胃給予120mg/kg美多芭，rLZ-8低、中、高劑量組分別腹腔注射60μg/kg rLZ-8、100μg/kg rLZ-8、160μg/kg rLZ-8，一直持續(xù)至MPTP末次給藥7天后。MPTP末次給藥7天后，對(duì)各組小鼠進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)：爬桿實(shí)驗(yàn)、懸掛實(shí)驗(yàn)、轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用免疫組化法檢測(cè)小鼠腦組織酪氨酸羥化酶（tyrosine hydroxylase，TH）的表達(dá)，ELISA法檢測(cè)小鼠腦組織白細(xì)胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）的含量，并使用比色法檢測(cè)小鼠腦組織超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的活力和丙二醛（malondialdehyde， MDA）的含量。 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，rLZ-8能縮短PD小鼠爬桿實(shí)驗(yàn)的掉頭時(shí)間和爬桿時(shí)間，延長(zhǎng)懸掛時(shí)間，改善懸掛情況，并延長(zhǎng)轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)潛伏期，減少掉落次數(shù)。免疫組化結(jié)果表明，rLZ-8能顯著增加PD小鼠黑質(zhì)TH陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，增強(qiáng)紋狀體神經(jīng)纖維上TH免疫陽(yáng)性反應(yīng)。此外，rLZ-8能顯著降低PD小鼠黑質(zhì)部位細(xì)胞因子IL-1β、IL-6的含量，增強(qiáng)SOD和GSH-Px活力，降低MDA含量。 通過(guò)上述的研究，初步證明rLZ-8能改善MPTP誘導(dǎo)的小鼠PD模型行為學(xué)損傷，拮抗MPTP誘導(dǎo)的DA能神經(jīng)元變性，表明rLZ-8對(duì)PD模型小鼠具有保護(hù)作用。其作用機(jī)制是通過(guò)抑制免疫反應(yīng)以及抑制氧化應(yīng)激發(fā)揮保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元的作用。上述數(shù)據(jù)初步表明rLZ-8是一種潛在的可用于臨床治療PD的藥物。
【關(guān)鍵詞】：帕金森病 重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白 動(dòng)物模型 氧化應(yīng)激 白細(xì)胞介素-1β 白細(xì)胞介素-6
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R742.5;R285.5;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 緒論11-21
• 1.1 帕金森病概述11
• 1.2 帕金森病藥物治療的進(jìn)展11-15
• 1.3 PD 與免疫學(xué)異常和氧化應(yīng)激之間的關(guān)系15-18
• 1.4 MPTP 模型在帕金森病研究中的應(yīng)用18
• 1.5 靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白的研究現(xiàn)狀18-21
• 第2章 材料和方法21-31
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料21-22
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物21
• 2.1.2 藥品和試劑21
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)耗材21-22
• 2.1.4 儀器設(shè)備22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法22-31
• 2.2.1 MPTP 誘導(dǎo)的小鼠 PD 模型的建立22-23
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法23
• 2.2.3 觀察指標(biāo)23-30
• 2.2.3.1 小鼠體重23
• 2.2.3.2 體征觀察23
• 2.2.3.3 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)23-26
• 2.2.3.4 小鼠腦組織各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)26-30
• 2.2.3.5 小鼠各臟器系數(shù)的測(cè)定30
• 2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理30-31
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-44
• 3.1 各組小鼠體重變化的測(cè)定結(jié)果31
• 3.2 各組小鼠體征變化的觀察結(jié)果31-33
• 3.3 各組小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的測(cè)定結(jié)果33-37
• 3.3.1 各組小鼠爬桿實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果33-34
• 3.3.2 各組小鼠懸掛實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果34-36
• 3.3.3 各組小鼠轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果36-37
• 3.4 小鼠腦組織各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果37-42
• 3.4.1 各組小鼠 TH 免疫組化染色結(jié)果37-39
• 3.4.2 各組小鼠腦組織 IL-1β含量測(cè)定結(jié)果39-40
• 3.4.3 各組小鼠腦組織 IL-6 含量測(cè)定結(jié)果40
• 3.4.4 各組小鼠 SOD 活力測(cè)定結(jié)果40-41
• 3.4.5 各組小鼠 MDA 含量測(cè)定結(jié)果41-42
• 3.4.6 各組小鼠 GSH-Px 活力測(cè)定結(jié)果42
• 3.5 小鼠各臟器系數(shù)測(cè)定結(jié)果42-44
• 第4章 結(jié)果分析與討論44-49
• 4.1 rLZ-8對(duì)小鼠無(wú)顯著毒副作用44
• 4.2 rLZ-8對(duì)PD 小鼠模型行為學(xué)損傷的改善作用44-45
• 4.3 rLZ-8對(duì)PD 小鼠模型 DA 能神經(jīng)元的保護(hù)作用45-46
• 4.4 rLZ-9對(duì)PD 小鼠模型促炎細(xì)胞因子的抑制作用46-47
• 4.5 rLZ-8對(duì)PD 小鼠模型氧化應(yīng)激的抑制作用47-49
• 第5章 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-58
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果58-59
• 致謝59

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1 劉黎星;葉維建;;更年期女性帕金森病動(dòng)物模型的建立與評(píng)價(jià)[J];莆田學(xué)院學(xué)報(bào);2008年02期

2 章素芳;衡鑫;樂(lè)衛(wèi)東;;帕金森病嗅覺(jué)障礙研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2010年22期

3 楊蓬勃;李淑華;;白細(xì)胞介素6對(duì)帕金森病和血管源性帕金森綜合征的臨床診斷意義[J];中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志;2011年01期

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5 王小同;;中醫(yī)藥抗帕金森病理想的動(dòng)物模型—Nurr1基因敲除小鼠[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2007年06期

6 高云朝;林祥通;;MPTP帕金森病動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2005年04期

7 鄧汝?yáng)|;李伊為;汪華僑;陳東風(fēng);張賽霞;趙丹;孟令杰;周健洪;黎暉;;重復(fù)注射6-羥多巴胺建立帕金森病動(dòng)物模型[J];解剖學(xué)研究;2007年06期

8 魯玲玲;周愛(ài)霞;楊慧;;AAV介導(dǎo)的α-synuclein基因過(guò)表達(dá)致多巴胺能神經(jīng)元損傷——一種制作輕度帕金森病大鼠模型的新方法[J];中國(guó)生物工程雜志;2009年01期

9 陳生弟,陳先文;帕金森病動(dòng)物模型的研制[J];中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志;2003年01期

10 姚慶和,高國(guó)棟;帕金森病模型小鼠的行為學(xué)特征及其檢測(cè)方法研究[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年28期

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1 張揚(yáng);邵蓓;;茶多酚對(duì)MPTP-帕金森病模型小鼠多巴胺神經(jīng)元的保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[A];2006年浙江省神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

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3 李景春;徐江濤;宋永斌;楊俊;許永華;鄒賽英;是文輝;劉海林;張子彥;;慢性間斷性缺氧對(duì)帕金森病模型小鼠行為學(xué)及黑質(zhì)病理改變的影響[A];中國(guó)睡眠研究會(huì)第六屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2010年

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5 劉承偉;封華;盧昕;陳敏;陳晨;;MPTP誘導(dǎo)小鼠帕金森病臨床前期模型的建立及其評(píng)價(jià)[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

6 劉云鶴;苗珍花;李震;成海燕;劉阿慶;許文斌;溫明菲;尚磊;陳璐;韓景獻(xiàn);于建春;;快速老化小鼠SAM-P/8出現(xiàn)類(lèi)帕金森病現(xiàn)象[A];2011中國(guó)針灸學(xué)會(huì)年會(huì)論文集（摘要）[C];2011年

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8 冉秋;何建成;;帕金森病大鼠模型中醫(yī)證候?qū)傩匝芯縖A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第九次中醫(yī)診斷學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

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中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 本報(bào)記者 羅朝淑;執(zhí)著科研博弈“沉默殺手”[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

2 匡遠(yuǎn)深;帕金森病臨床前期小鼠模型建立[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

3 匡遠(yuǎn)深;小鼠模型助帕金森病早診早治[N];健康報(bào);2008年

4 記者 葉平生　通訊員 肖頌華;帕金森病患者 最好多喝茶水[N];廣州日?qǐng)?bào);2004年

5 ;怎樣促進(jìn)帕金森病患者康復(fù)[N];家庭醫(yī)生報(bào);2005年

6 新華;南京啟用“細(xì)胞刀”治療帕金森病[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2000年

7 馬成功 指導(dǎo)專(zhuān)家/湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)分泌科主任 周德生 宣武醫(yī)院功能神經(jīng)外科副主任醫(yī)師 張宇清;帕金森病 中老年人“第三殺手”[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2009年

8 劉振國(guó);焦慮抑郁可能是帕金森病先兆[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2009年

9 北京世紀(jì)壇醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 屠建瑩;帕金森病患者康復(fù)十法[N];健康報(bào);2009年

10 記者 靖九江;應(yīng)重視帕金森病早期治療方案的選擇[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李超;多巴胺受體激動(dòng)劑在帕金森模型中的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2010年

2 任海剛;帕金森病和癌癥相關(guān)蛋白DJ-1在自噬和線粒體的功能研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2010年

3 陳冬;帕金森病相關(guān)蛋白Parkin對(duì)自噬調(diào)節(jié)的研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2010年

4 王濤;普利醇抗帕金森病的藥效學(xué)及其機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

5 陳宏;沒(méi)食子�；�-β-右旋葡萄糖對(duì)帕金森病細(xì)胞模型的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2011年

6 洪雁;帕金森病相關(guān)基因研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2003年

7 徐t2t2;人參皂苷-Re對(duì)帕金森病模型小鼠腦內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元保護(hù)作用機(jī)制的研究[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2004年

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1 丁生晨;重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白對(duì)帕金森病模型小鼠的作用及其機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2013年

2 黃帥;GFRα1在帕金森病動(dòng)物模型中表達(dá)量的變化及其基因的克隆與表達(dá)[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 王志永;針刺督脈學(xué)對(duì)帕金森病小鼠腦線粒體功能的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 張紅英;帕金森病運(yùn)動(dòng)并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)因素分析[D];山東大學(xué);2010年

5 孫啟英;GBA基因突變與中國(guó)人群帕金森病相關(guān)性研究[D];中南大學(xué);2010年

6 王薇;應(yīng)用電生理技術(shù)評(píng)價(jià)帕金森病的自主神經(jīng)功能及運(yùn)動(dòng)單位數(shù)目[D];蘇州大學(xué);2004年

7 吳鎮(zhèn)U

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