發(fā)布時間：2017-07-08 04:06

  本文關鍵詞：重組人鼠嵌合抗CD20單克隆抗體免疫原性檢測方法的建立

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【摘要】：目的:建立一種靈敏、特異、操作簡單的ELISA方法,用于檢測食蟹猴血清中抗CD20單克隆抗體的免疫原性。方法:首先采用橋連ELISA法對抗藥物抗體(ADA)進行定性篩選,以抗CD20單克隆抗體作為包被抗體,以生物素標記的抗CD20單克隆抗體作為檢測抗體,二者共同結合血清中存在的ADA,以D450/560nm值超過臨界值作為陽性判斷標準;初篩為陽性的樣本采用免疫清除法進一步確證,并同時進行免疫交叉試驗考察ADA對供試品和原研對照品的免疫反應有無差異。結果:建立了檢測ADA的篩選方法和確證方法,確定了檢測的臨界值和歸一化因子,血清中抗藥物抗體的檢測靈敏度達3.5 ng/m L,批內/批間精密度介于3.1%~7.4%,準確度介于-1.2%~9.5%;食蟹猴連續(xù)給藥后,部分個體產(chǎn)生特異性抗體,且抗體滴度隨時間延長而增高。結論:建立的ADA篩選方法和確證方法可用于毒性試驗的免疫原性檢測;動物給藥劑量對抗體的產(chǎn)生有較大影響,低劑量連續(xù)給藥更易誘發(fā)特異性抗體產(chǎn)生。
【作者單位】： 北京理工大學生命學院;軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所;軍事醫(yī)學科學院放射醫(yī)學研究所國家蛋白質組學重點實驗室北京蛋白質組研究中心;
【關鍵詞】： 抗CD單克隆抗體 橋聯(lián)ELISA 免疫原性
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 3.軍事醫(yī)學科學院放射醫(yī)學研究所,國家蛋白質組學重點實驗室,北京蛋白質組研究中心,北京102206CD20是B淋巴細胞表面特異性抗原之一,在淋巴細胞分化早期表達并且能激活淋巴細胞,導致淋巴細胞增殖分化。CD20分子在95%以上的B細胞性非霍奇金淋巴瘤(NHL)中均有表達,是治療B細胞淋

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