貼壁法和密度梯度離心法分離經(jīng)血源性子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的比較研究
發(fā)布時(shí)間:2017-07-05 18:21
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【摘要】:目的:比較貼壁法和密度梯度離心法對(duì)經(jīng)血源性子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞(MB-MSCs)的分離效果。方法:選擇25~35歲月經(jīng)周期正常的健康女性的月經(jīng)血,分別采用貼壁法和密度梯度離心法分離MB-MSCs并進(jìn)行傳代。鏡下觀察原代細(xì)胞形態(tài)變化;對(duì)比原代及第2、3代細(xì)胞傳代時(shí)間;流式細(xì)胞儀檢測(cè)表面標(biāo)志物;阿爾辛蘭染色檢測(cè)其成軟骨能力。結(jié)果:貼壁法分離的原代細(xì)胞呈聚集樣生長(zhǎng),密度梯度離心法分離的原代細(xì)胞6 d后也呈聚集樣生長(zhǎng)。貼壁法分離原代細(xì)胞的傳代時(shí)間(14.58±1.31)d明顯快于密度梯度離心法(19.17±1.34)d,差異有顯著意義(P0.05);第2、3代細(xì)胞的傳代時(shí)間兩種分離方法差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè),兩種方法分離的MB-MSCs陽性表面標(biāo)志物CD44、CD29、CD105、CD73含量和陰性表面標(biāo)志物CD31、CD45含量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),兩種方法分離的第3代細(xì)胞經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)后比較無顯著差別。結(jié)論:采用貼壁法與密度梯度離心法分離MB-MSCs效果相似,但貼壁法更適用于早期快速獲得純度較高的細(xì)胞。
【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科;武警后勤學(xué)院病原生物與免疫學(xué)教研室;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院血液學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室干細(xì)胞醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】: 間充質(zhì)干細(xì)胞 子宮內(nèi)膜 經(jīng)血 貼壁法 密度梯度離心法
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81303108)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 目前,干細(xì)胞在組織工程、細(xì)胞工程領(lǐng)域潛在應(yīng)用價(jià)值越來越受到人們重視,迄今,已從成年人的骨髓、胚胎、臍血、外周血[1-4]等中發(fā)現(xiàn)了間充質(zhì)干細(xì)胞。2007年,Meng等[5]從健康女性的月經(jīng)血中分離出干細(xì)胞,這是一種新型的干細(xì)胞稱為經(jīng)血源性間充質(zhì)干細(xì)胞(menstrual blood mesenchy
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 徐忠華;吳清玉;;貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性[J];中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2007年05期
中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 馬洪梅;張曉梅;馮卓蕾;付小波;林英;李偉軍;;組織塊貼壁法培養(yǎng)兔的視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年
,本文編號(hào):523058
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