發(fā)布時間：2017-06-30 22:02

  本文關(guān)鍵詞：布魯氏菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)效應蛋白BspB的原核表達及布魯氏菌免疫逃逸分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的克隆并表達布魯氏菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)效應蛋白BspB并推測其免疫逃逸機制。方法以羊種布魯氏菌16M基因組為模板,利用PCR擴增布魯氏菌分泌蛋白BspB(BAB1-0712)基因,連接pMD19-T載體后測序,將測序正確的基因片段經(jīng)雙酶切后克隆至pET-30a載體中,轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導表達,通過SDS-PAGE和Western blot分析鑒定表達產(chǎn)物。結(jié)果成功克隆了BspB基因,片段大小為564bp;SDS-PAGE檢測,BspB蛋白分子質(zhì)量單位約為27.5ku;Western blot分析顯示,BspB蛋白均可被布魯氏菌陽性血清識別。該蛋白測序后與先天性免疫分子IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4、SIGIRR比對,具有一定的同源性。結(jié)論重組蛋白BspB具有免疫反應原性,可作為候選診斷抗原;由于其序列與IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4及SIGIRR有一定同源性,BspB可能在布魯氏菌感染宿主過程中發(fā)揮免疫逃逸的作用。
【作者單位】： 石河子大學醫(yī)學院病原生物學與免疫學教研室;石河子大學動物科技學院;銅仁學院生物與農(nóng)林工程學院;
【關(guān)鍵詞】： 布魯氏菌 效應蛋白 Ⅳ型分泌系統(tǒng) 原核表達 免疫逃逸
【基金】：杰出青年科技人才培育計劃項目(No.2013ZRKXJQ06) 高層次人才科研啟動資金專項(No.RCZX201228) 博士科研啟動基金項目(No.trxyDH1504)
【分類號】：R378.5
【正文快照】： [Journal of Pathogen Biology.2015Sep;10(9):778-781,815.]Prokaryotic expression of BspB protein of the type IV secretion system of Brucella and analysis of im-mune evasion by Brucella于宿主細胞(如巨噬細胞、樹突細胞、滋養(yǎng)層細胞、上皮細胞等)內(nèi),并且能夠在宿

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本文編號：503585