發(fā)布時間：2017-06-26 11:02

  本文關(guān)鍵詞：微小RNA-27b過表達對殘粒脂蛋白誘導(dǎo)的小鼠內(nèi)皮祖細胞衰老的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管內(nèi)皮細胞的前體細胞,有保持血管內(nèi)皮細胞完整和維持正常血管內(nèi)皮功能的作用。EPCs的衰老和數(shù)量減少與冠心病等缺血性心腦血管疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。p16INK4α是調(diào)控干/祖細胞衰老的重要轉(zhuǎn)錄因子。餐后高甘油三酯血癥患者血漿中的殘粒脂蛋白(remnant-like particles, RLPs)能夠誘導(dǎo)人外周血來源的EPCs衰老,劑量依賴性地上調(diào)p16INK4α的蛋白水平。微小RNA(microRNA,miRNA/miR)是一類高度保守的、由18～22個核苷酸構(gòu)成的非編碼單鏈RNA,在轉(zhuǎn)錄后水平負向調(diào)控靶基因的表達。已知人RLPs可促進小鼠EPCs的衰老,伴miR-27b表達顯著下調(diào)。由此推測miR-27b可能參與調(diào)控RLPs誘導(dǎo)的小鼠EPCs衰老。 目的用miR-27b模擬物(mimic)轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源EPCs,觀察niR-27b過表達對RLPs誘導(dǎo)的EPCs衰老過程的影響。 方法密度梯度離心法提取小鼠雙下肢骨髓單個核細胞,4天后棄去未貼壁細胞。用EBM-2完全培養(yǎng)基培養(yǎng)至第7天后,將細胞分為miR-27b過表達組和對照組,分別轉(zhuǎn)染miR-27b mimic及其對照物,24h后用0.2mg/mL的RLPs同時干預(yù)兩組細胞。24h后行衰老相關(guān)-β-半乳糖苷酶(senescense associated-β-galactosidase,SA-β-Gal)染色、分別計數(shù)兩組衰老細胞百分率；提取總RNA,測定兩組細胞中miR-27b、衰老相關(guān)基因p16INK4α的mRNA水平。 結(jié)果成功分離培養(yǎng)出小鼠骨髓源性EPCs,使miR-27b在EPCs中表達水平顯著上調(diào)37倍。miR-27b過表達組的衰老細胞百分率為29.4%,對照組為21.4%。miR-27b過表達組的衰老相關(guān)基因p16INK4α的mRNA水平低于對照組,但無統(tǒng)計學(xué)顯著性。 結(jié)論miR-27b過表達可能對RLPs誘導(dǎo)的小鼠骨髓源性EPCs衰老起負性調(diào)節(jié)作用,但機制還需要進一步探討。
【關(guān)鍵詞】：miR-27b 內(nèi)皮祖細胞衰老 p16~(INK4α)
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• ~.略語10-11
• 第一章 前言11-12
• 第二章 材料與方法12-25
• 2.1 材料12-14
• 2.2 方法14-25
• 第三章 結(jié)果25-29
• 3.1 小鼠EPCs體外培養(yǎng)和鑒定25-27
• 3.2 MiR-27b在EPCs中過表達27
• 3.3 MiR-27b過表達可抑制RLPs誘導(dǎo)的EPCs衰老27-28
• 3.4 MiR-27b過表達對衰老相關(guān)基因mRNA表達的影響28-29
• 第四章 討論29-33
• 第五章 結(jié)論33-34
• 參考文獻34-39
• 綜述39-52
• 參考文獻45-52
• 致謝52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 周曉峰;王佐;;內(nèi)皮祖細胞在動脈粥樣硬化進程中的作用[J];中國動脈硬化雜志;2007年12期

2 李美玲;劉鳳姣;劉玲;;小鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中國動脈硬化雜志;2011年06期

3 寇恂;曾春雨;;微小RNA在心血管疾病發(fā)生中的作用研究進展[J];中華高血壓雜志;2011年08期

  本文關(guān)鍵詞：微小RNA-27b過表達對殘粒脂蛋白誘導(dǎo)的小鼠內(nèi)皮祖細胞衰老的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：485855