本文關鍵詞：丙型肝炎病毒NS3蛋白的原核表達及多克隆抗體制備，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：提高對丙型肝炎患者實驗室檢測的靈敏度和特異性,對相關人群進行篩查和早期診斷,是控制丙型肝炎病毒(HCV)流行與傳播的有效措施。為了建立更為可靠的HCV診斷方法,通過采用PCR方法從J6/JFH12a型病毒中克隆出HCV ns3基因片段,將其連接到p ET-28a載體上,重組載體p ET-28a-ns3轉化大腸桿菌BL21(DE3)后誘導表達,以10%SDS-PAGE進行鑒定,獲得表達的NS3重組蛋白分子量為72 k Da。將純化的NS3蛋白免疫BALB/c小鼠,第4次免疫后采集血液并分離血清進行抗體活性鑒定,小鼠抗體效價為1∶256 000。進一步的Western blotting和間接免疫熒光結果顯示,以重組NS3蛋白免疫小鼠制備的多克隆抗體可以很好地識別HCV感染Huh7.5.1細胞中的NS3蛋白,為下一步開展單克隆抗體制備和檢測試劑盒研制工作奠定了基礎。
【作者單位】： 昆明理工大學生命科學與技術學院;云南省分子醫(yī)學研究中心;
【關鍵詞】： 丙型肝炎病毒 B細胞表位 NS蛋白 多克隆抗體
【基金】：國家自然科學基金(No.81260248) 國家科技支撐計劃項目(No.2014BAI01B01) 云南省應用基礎研究計劃(No.KKS0201326002) 昆明理工大學人才培養(yǎng)基金(No.KKSY201326085) 云南省科技創(chuàng)新平臺建設計劃(No.2012DA002)資助~~
【分類號】：R373.21
【正文快照】： Received:September 13,2014;Accepted:December 10,2014Supported by:National Natural Science Foundation of China(No.81260248),National Science and Technology Surport Program ofChina(No.2014BAI01B01),Applied Basic Research Projects of Yunnan Province(No.KKS0

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本文編號：482514