本文關鍵詞：甘油二酯激酶γ和ζ在大鼠胚胎發(fā)育過程中的時空表達，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 檢測大鼠胚胎期甘油二酯激酶γ(DGKyγ)和(DGKζ)在mRNA和蛋白水平的表達,探討DGKγ和DGKζ生大鼠胚胎發(fā)育過程中的時空表達規(guī)律。方法： (1)用地高辛配基標記的DGKγ和DGKζ寡核苷酸探針,與E8.5-E12.5大鼠胚胎進行整體原位雜交,檢測DGKγmRNA和DGKζmRNA在大鼠胚胎不同發(fā)育階段的時空表達變化； (2)應用免疫組織化學方法觀察DGKy蛋白和DGKζ蛋白在E12.5-E18.5大鼠胚胎神經(jīng)系統(tǒng)的表達。 結(jié)果： (1)整體胚胎原位雜交(WMISH)檢測結(jié)果： WMISH檢測發(fā)現(xiàn),DGKy mRNA在E10.5胚胎的前神經(jīng)孔、頭端神經(jīng)管和后神經(jīng)孔的壁呈陽性表達；E11.5胚胎的端腦泡、中腦泡、上頜突和前肢芽明顯呈陽性；E12.5胚胎陽性信號較強,集中表達在腦泡。 DGKζ mRNA在E8.5胚盤的外胚層呈現(xiàn)陽性,E9.5胚盤原條末端和原溝呈雜交陽性；E10.5胚胎出現(xiàn)較強的陽性信號,分布在前神經(jīng)孔壁和頭端神經(jīng)管；E11.5胚胎的端腦泡、中腦泡、上頜突呈較強陽性；E12.5胚胎在端腦、中腦、背根神經(jīng)節(jié)、三叉神經(jīng)節(jié)、視泡、上頜突、下頜突等處呈陽性信號。 大鼠胚胎WMISH后冰凍切片觀察可見：DGKγ mRNA在腦泡和部分神經(jīng)管的神經(jīng)上皮呈陽性信號,DGKζ mRNA主要表達在神經(jīng)上皮的游離面,體節(jié)也可見陽性。 (2)免疫組織化學結(jié)果： DGKyγ蛋白在E12.5大鼠胚胎的腦和脊髓的神經(jīng)上皮呈陽性表達,并且在底板的表達較強,背根神經(jīng)節(jié)也呈陽性表達；在E13.5和E14.5大鼠胚胎腦和脊髓的神經(jīng)上皮陽性表達減弱,但在其底板的表達仍較強,在背根神經(jīng)節(jié)和三叉神經(jīng)節(jié)有陽性表達；在E15.5-18.5胚胎,DGKyγ表達在脊髓基板和灰質(zhì)的前角,在背根神經(jīng)節(jié)的表達增強。 DGKζ蛋白在E12.5-18.5大鼠胚胎的表達模式與DGKyγ相似,但在E18.5DGKζ的表達明顯降低,在脊髓灰質(zhì)前角和背根神經(jīng)節(jié)呈弱陽性表達。結(jié)論： 1.DGKζmRNA在外胚層和原條有明顯表達,提示DGKζ可能參與了三胚層的形成。 2. DGKγ mRNA在前后神經(jīng)孔呈強陽性表達,而DGKζ mRNA在前神經(jīng)孔呈強陽性表達,提示DGKy和DGKζ均參與了神經(jīng)孔的閉合。 3. DGKγ和DGKζ在腦、脊髓和背根神經(jīng)節(jié)的表達變化提示它們與神經(jīng)系統(tǒng)器官的早期發(fā)育有關。
【關鍵詞】：甘油二酯激酶γ 甘油二酯激酶ξ 胚胎發(fā)育 時空表達 整體原位雜交 免疫組化 大鼠
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R321
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 第一部分 E8.5 -E12.5大鼠胚胎整體原位雜交技術的建立10-19
• 前言10-11
• 材料與方法11-14
• 1. 實驗材料11-12
• 1.1 實驗動物11
• 1.2 主要試劑11
• 1.3 探針設計11-12
• 2. 實驗方法12-14
• 2.1 大鼠胚胎標本的收集12
• 2.2 整體胚胎原位雜交12-14
• 2.3 陰性對照14
• 結(jié)果14-15
• 1. 蛋白酶K消化結(jié)果14
• 2. 寡核苷酸探針WMISH結(jié)果14-15
• 討論15-17
• 參考文獻17-19
• 第二部分 DGK_γ和DGKζ在大鼠胚胎發(fā)育過程中的時空表達19-29
• 前言19-20
• 材料與方法20-21
• 1. E8.5-E12.5大鼠胚胎整體原位雜交20
• 2. WMISH后冰凍切片20
• 3. 免疫組織化學染色20-21
• 3.1 石蠟切片制備20
• 3.2 SABC法檢測20-21
• 結(jié)果21-22
• 1. DGK_γmRNA和DGKζmRNA在E8.5-E12.5大鼠胚胎的表達21-22
• 2. DGK_γ和DGKζ蛋白在E12.5-E18.5大鼠胚胎的表達22
• 討論22-24
• 小結(jié)24-25
• 參考文獻25-29
• 附圖29-38
• 攻讀學位期間發(fā)表論文情況38-39
• 致謝39-40
• 個人簡歷40

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳燕,馬子敏,劉淑紅,范文紅,范明;小鼠胚胎整體原位雜交實用技術的建立[J];解剖學報;2004年04期

  本文關鍵詞：甘油二酯激酶γ和ζ在大鼠胚胎發(fā)育過程中的時空表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：478793