本文關(guān)鍵詞：利用乙型肝炎病毒共價(jià)閉合環(huán)狀DNA構(gòu)建慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過水動(dòng)力法注射乙型肝炎病毒(HBV)共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)構(gòu)建C57BL/6小鼠慢性乙型肝炎病毒感染的模型。方法取29只C57BL/6小鼠,分為實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組和空白組,應(yīng)用水動(dòng)力法分別注射HBV cccDNA、pAAV-HBV1.2及等滲鹽水,于注射后收集不同時(shí)間點(diǎn)的血清和肝組織。利用放射免疫法檢測(cè)血清樣本中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg);熒光定量PCR檢測(cè)血清和肝組織中HBV DNA拷貝數(shù);免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肝組織中HBsAg和乙型肝炎病毒核心抗原(HBc Ag)的表達(dá);蘇木精-伊紅(HE)染色觀察肝組織病理變化;使用SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組HBsAg和HBeAg表達(dá)均呈現(xiàn)4個(gè)上升-下降曲線:HBsAg峰值分別出現(xiàn)在第3天、第3周、第7周和第9周;HBeAg峰值分別出現(xiàn)在第1天、第1周、第4周和第10周。對(duì)照組HBsAg和HBeAg表達(dá)分別呈現(xiàn)2個(gè)或3個(gè)明顯的峰:HBsAg峰值分別出現(xiàn)在第3天和第8周;HBeAg峰值分別出現(xiàn)在第1天、第3周和第10周�？瞻捉M未檢測(cè)出HBsAg和HBeAg。實(shí)驗(yàn)組HBV DNA拷貝數(shù)高于對(duì)照組的拷貝數(shù)(P0.01);肝組織中HBV DNA拷貝數(shù)高于同期血清中的拷貝數(shù)(P0.01);實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的肝組織中均有HBsAg和HBc Ag的表達(dá);實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組出現(xiàn)肝臟細(xì)胞炎癥、肝細(xì)胞纖維化、肝細(xì)胞壞死等病理變化,而空白組正常。結(jié)論利用水動(dòng)力法向C57BL/6小鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)入HBV cccDNA,成功建立了慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型,與對(duì)照組比較,新建立的小鼠乙肝模型具有更高的HBV表達(dá),動(dòng)物模型為研究乙型肝炎病毒HBV cccDNA的感染及其引起肝損傷的機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;重慶醫(yī)科大學(xué)感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 乙型肝炎病毒 HBV共價(jià)閉合環(huán)狀DNA 水動(dòng)力法 小鼠模型
【基金】：重慶市科委重大項(xiàng)目(CSTC2013yykfc1005)
【分類號(hào)】：R512.62;R-332
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)是一種嗜肝DNA病毒,有較強(qiáng)的種屬特異性,自然條件下只感染人和非人靈長類動(dòng)物(如黑猩猩等),主要通過血液及體液傳播感染(GuidottiChisari,2006)。HBV感染不僅可以導(dǎo)致急、慢性病毒性肝炎和重性肝炎,而且還與肝硬化(liver cirrhosis,LC)和

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1 張v

本文編號(hào)：475087