本文關(guān)鍵詞：體外譜系選擇法誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞神經(jīng)分化特性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究體外譜系選擇法誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞(ES)神經(jīng)分化的特點(diǎn),建立ES細(xì)胞體外神經(jīng)分化的模型。方法通過(guò)懸滴和懸浮培養(yǎng)、Nestin陽(yáng)性篩選培養(yǎng)、神經(jīng)樣細(xì)胞增殖培養(yǎng)以及神經(jīng)細(xì)胞分化培養(yǎng)的方法,建立體外誘導(dǎo)未分化的ES細(xì)胞分化為多巴胺能神經(jīng)元模型;觀察各神經(jīng)分化及各階段的ES細(xì)胞形態(tài),并通過(guò)RT-PCR以及熒光免疫化學(xué)方法檢測(cè)各分化階段ES細(xì)胞神經(jīng)特異表達(dá)基因和蛋白的表達(dá)特點(diǎn);通過(guò)高效液相檢測(cè)各階段分化細(xì)胞分泌神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺的能力。結(jié)果隨著分化培養(yǎng)階段的延長(zhǎng),分化的ES細(xì)胞中可見(jiàn)大量神經(jīng)樣細(xì)胞出現(xiàn),分化末期可見(jiàn)清晰的神經(jīng)元結(jié)構(gòu)(包括突觸);分化早期,僅有部分神經(jīng)細(xì)胞特異基因和蛋白表達(dá),且表達(dá)水平低,隨著培養(yǎng)階段延長(zhǎng),特異基因和蛋白均表達(dá),且表達(dá)水平明顯增加;神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺的水平在未分化和分化早期細(xì)胞中未檢出,分化的中后期可檢測(cè)出并呈現(xiàn)隨分化時(shí)間延長(zhǎng)而增加的趨勢(shì)。結(jié)論建立的體外譜系選擇培養(yǎng)方法可誘導(dǎo)ES細(xì)胞分化獲得具有多巴胺能神經(jīng)元特性的細(xì)胞,可為神經(jīng)發(fā)育毒性研究提供模型。
【作者單位】： 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心 衛(wèi)生部風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 胚胎干細(xì)胞 譜系選擇法 神經(jīng)分化 體外試驗(yàn) 毒理
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(81102134) 轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2012ZX08011001)
【分類號(hào)】：R321
【正文快照】： 衛(wèi)生部風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100022)神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育成熟需要一個(gè)相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間,且具有高度的時(shí)間性和區(qū)域性特點(diǎn),所以這一時(shí)期是神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)神經(jīng)毒物的高敏感期,任何外來(lái)因素對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程的干擾都可能造成永久性的損傷[1],因此在進(jìn)行神經(jīng)發(fā)育毒性作用機(jī)制研究時(shí),一個(gè)能真

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 劉海波;支媛;馮永全;戴抒豪;于洲;;以ITSFn誘導(dǎo)法為基礎(chǔ)的神經(jīng)發(fā)育毒性評(píng)價(jià)模型的建立及其有效性研究[J];中國(guó)食品衛(wèi)生雜志;2013年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 張建;顧茵;羅學(xué)勝;楊忠;李紅麗;蔡文琴;;氯化鋰通過(guò)激活Wnt信號(hào)通路促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖[J];濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年06期

2 劉曉東;張夏南;郝寧;鞠前前;秦建兵;田美玲;金國(guó)華;呂廣明;;雌二醇對(duì)大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖的影響[J];解剖學(xué)報(bào);2014年05期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 竇婷婷;百草枯對(duì)人胚胎神經(jīng)干細(xì)胞氧化損傷機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 于洲;徐海濱;;體外誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞特性的實(shí)驗(yàn)研究[J];衛(wèi)生研究;2010年05期

  本文關(guān)鍵詞：體外譜系選擇法誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞神經(jīng)分化特性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：463282