TLR7在呼吸道合胞病毒感染A549細(xì)胞誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素中的作用
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【摘要】:目的探討Toll樣受體7(TLR7)在呼吸道合胞病毒(RSV)感染A549細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生I型干擾素(IFN)抗病毒免疫反應(yīng)中的作用。方法實(shí)驗(yàn)分正常對(duì)照組、RSV感染組、TLR7 siRNA沉默組,分別于感染的4、8、12、24 h后收集各組細(xì)胞以及培養(yǎng)上清液。TLR7 siRNA通過(guò)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞,半定量RT-PCR法檢測(cè)TLR7基因沉默效果;TRIzol試劑提取細(xì)胞總RNA,檢測(cè)TLR7、干擾素調(diào)節(jié)因子7(IRF7)、IFN-α、IFN-β的mRNA表達(dá)量變化;通過(guò)Western blot法檢測(cè)TLR7蛋白表達(dá)量;ELISA法檢測(cè)感染不同時(shí)間點(diǎn)A549細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IFNα/β含量的變化。結(jié)果 1轉(zhuǎn)染24h后TLR7 siRNA-2有效抑制TLR7 mRNA表達(dá);2 RSV感染A549細(xì)胞后,TLR7、IRF7、IFN-α/β的mRNA以及TLR7蛋白的表達(dá)量均升高,并與RSV感染之間存在時(shí)間依賴性關(guān)系;沉默TLR7后,TLR7、IRF7、IFN-α/β的mRNA以及TLR7蛋白的表達(dá)量較感染組均有明顯下降;3 RSV感染A549細(xì)胞后,明顯上調(diào)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IFN-α/β的水平,TLR7siRNA沉默組IFN-α/β的表達(dá)水平較RSV感染組均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且IFN-α的表達(dá)量下調(diào)更為顯著。結(jié)論RSV感染A549細(xì)胞后,TLR7被活化能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生I型IFN,發(fā)揮抗病毒作用,且TLR7誘導(dǎo)產(chǎn)生的I型IFN以IFN-α為主。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物學(xué)教研室;安徽醫(yī)科大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 呼吸道合胞病毒 A細(xì)胞 Toll樣受體 siRNA Ⅰ型干擾素
【基金】:安徽高校省級(jí)自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(編號(hào):KJ2012A152) 安徽省自然科學(xué)基金(編號(hào):1308085MH129) 安徽省級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):AH201410366135)
【分類號(hào)】:R373
【正文快照】: 2015-06-20接收呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是一種有包膜單負(fù)鏈的RNA病毒,屬于副黏病毒科肺炎病毒屬[1],是世界范圍內(nèi)嬰幼兒嚴(yán)重下呼吸道感染(包括肺炎和細(xì)支氣管炎)的最常見(jiàn)病原體[2-3]。目前RSV感染的病理機(jī)制尚不明確,迄今仍無(wú)理想的治療藥物和疫苗。
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 黃升海;劉偉;史曉佾;;呼吸道合胞病毒誘導(dǎo)一氧化氮產(chǎn)生的機(jī)制[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2009年04期
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
1 張艷芳;馬春旺;金嬋;晉若冰;湯瑩;楊勇驥;;2種晶型納米二氧化鈦材料對(duì)A549細(xì)胞的毒性效應(yīng)[J];河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年02期
2 孫曉東;王s
本文編號(hào):456899
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