本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用RNA干擾技術(shù)對(duì)旋毛蟲(chóng)蛋白酶體β7亞基基因功能的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究旋毛蟲(chóng)蛋白酶體β7亞基(T.spiralis proteasome subunit beta type-7,Tspst)的基因功能。方法通過(guò)浸泡法將Tspst特異性的dsRNA(dsRNA-Tspst)導(dǎo)入旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)體內(nèi),應(yīng)用Real-time PCR和Western blot檢測(cè)經(jīng)dsRNA-Tspst浸泡處理后幼蟲(chóng)Tspst基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平。體外培養(yǎng)觀察Tspst基因沉默對(duì)幼蟲(chóng)存活的影響。將dsRNA浸泡后的幼蟲(chóng)經(jīng)口接種小鼠,觀察Tspst基因沉默對(duì)幼蟲(chóng)發(fā)育、存活及雌成蟲(chóng)生殖力的影響。結(jié)果Realtime PCR和Western blot檢測(cè)顯示,旋毛蟲(chóng)幼蟲(chóng)經(jīng)40ng/μl dsRNA浸泡處理后Tspst基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)分別下降71.87%和61.9%(P0.05)。dsRNA浸泡處理組、Lip2000和PBS對(duì)照組幼蟲(chóng)的死亡率分別是33.4%、35%和35.4%(χ2=0.118,P0.05)。將dsRNA浸泡的幼蟲(chóng)接種小鼠后6d,腸道成蟲(chóng)與35d肌幼蟲(chóng)的減蟲(chóng)率分別為26.51%和38.34%。dsRNA浸泡處理組、Lip2000和PBS對(duì)照組幼蟲(chóng)感染小鼠收集的雌蟲(chóng)體外培養(yǎng)72h新生幼蟲(chóng)產(chǎn)量分別是53.26±3.99、50.80±3.08和53.70±2.57條(P0.05)。結(jié)論 dsRNA可明顯抑制Tspst基因的表達(dá)及幼蟲(chóng)在小鼠體內(nèi)的發(fā)育和存活。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院寄生蟲(chóng)學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 旋毛蟲(chóng) 蛋白酶體β亞基 RNA干擾 dsRNA
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81271860,81471981) 高校博士點(diǎn)專(zhuān)項(xiàng)科研基金項(xiàng)目(No.20124101110005)
【分類(lèi)號(hào)】：R383.15
【正文快照】： ***significantly inhibited the expression of Tspst in T.spiralis and it inhibited larval development and survival in mice.RNA干擾(RNA interference,RNAi)最早在秀麗隱桿線蟲(chóng)中被發(fā)現(xiàn)和證實(shí)[1]。RNAi是真核生物體內(nèi)一種由雙鏈RNA(Double-stranded RNA,dsRNA)介導(dǎo)的

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【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用RNA干擾技術(shù)對(duì)旋毛蟲(chóng)蛋白酶體β7亞基基因功能的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：453535